Определение активности антибиотиков методом диффузии в агар

Для оценки качества антибиотиков и их лекарственных форм, активность которых невозможно оценить химическими методами, используют метод диффузии в агар. Метод описан в ГФ XII, часть 1 (ОФС 42-0068-07 ) в двух вариантах: трехдозный вариант метода диффузии в агар и определение с использованием стандартной кривой. Метод основан на прямопропорциональной зависимости размеров зон угнетения тест-микроорганизмов, используемых в опыте, от логарифма концентрации (дозы) антибиотика в растворе, вносимого на агаризованную зараженную питательную среду. На размеры зон влияет множество факторов: чувствительность тест-микроорганизма к испытуемому антибиотику, однородность и плотность микробного газона, состав питательной среды и ее количество, вносимое в чашки Петри, химическая природа антибиотика и его доза, используемая при постановке опыта. Определение активности испытуемого препарата проводят путем сравнения с установленной активностью стандартного образца конкретного антибиотика, при этом стандартный образец должен быть высокого фармакопейного качества. Для оценки подтверждения валидности условий проведения испытания используют статистические метода расчета, рассчитывают доверительный интервал при вероятности 95% для подтверждения точности полученных результатов и относительное стандартное отклонении для подтверждения их сходимости.

антибиотики, метод диффузии в агар, питательная среда, тест-микроорганизм, линейная зависимость, биологическая активность, стандартный образец, antibiotics, agar diffusion, medium, test microorganism, linear dependence, biological activity, reference standard

1. United States Pharmacopaeia USP 38-NF33. 2015.

2. Gribbs D.L. Antibiotic Potency Assay as Described in USP Chapter (81), Pharmaceutical Microbiology Forum Newsletter. 2008; 14(7): 2-15.

3. Дмитриева В.С., Семенов С.М. Микробиологический контроль антибиотических препаратов. М.: Медицина, 1965.

4. Гров Д.С., Рендалл В.А. Руководство по лабораторным методам исследования антибиотиков, М.: Медгиз, 1958.

5. Hewitt W. Microbiological Assay for Pharmaceutical AnaLysis, 2003.

6. ОФС 42-0068-07 «Определение антимикробной активности антибиотиков». В: Государственная фармакопея Российской Федерации. 12-е изд. Ч. 1. М.: Научный центр экспертизы средств медицинского применения; 2007.

7. European Pharmacopoeia. 8th ed.

8. Юргель Н.В., Младенцев А.Л., Бурдейн А.В., Гельман М.А., Малин А.А., Косенко В.В., ред. Руководство по валидации методик анализа лекарственных средств. Методические рекомендации. М.; 2007.

9. Шадрин П.В., Симутненко Л.В., Батуашвили Т.А., Неугодова Н.П., Лутцева А.И. Алгоритм валидации биологических методик определения гормональной активности лекарственных средств (на примере фолликулостимулирующего гормона). Ведомости научного центра экспертизы средств медицинского применения 2011; (2): 15-8.

10. Статистическая обработка результатов определения специфической фармакологической активности препаратов биологическими методами. В: Государственная фармакопея СССР. 11-е изд. Ч. 1. М.: Медицина; 1990.

11. Рекомендации по межгосударственной стандартизации «Показатели точности, правильности, прецизионности методик количественного химического анализа». Методы оценки. РМГ 61-2003. М.; 2010.