Определение аскорбиновой кислоты в лекарственных растительных препаратах методом ВЭЖХ

Аскорбиновая кислота (витамин С) участвует во многих биохимических процессах в организме человека, необходимых для его жизнедеятельности. Одним из природных источников витамина С являются плоды шиповника, которые применяются в виде отваров и являются компонентом многих витаминных сборов. Методы количественного определения аскорбиновой кислоты, включенные в фармакопейные статьи Государственной фармакопеи Российской Федерации, имеют ряд недостатков, что не позволяет объективно оценить содержание аскорбиновой кислоты в лекарственном растительном сырье (ЛРС) и лекарственных растительных препаратах (ЛРП).

Цель работы: разработка методики количественного определения аскорбиновой кислоты в ЛРС и ЛРП методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Материалы и методы. Объектами исследования служили лекарственные растительные препараты «Плоды шиповника» и «Витаминный сбор № 2», стандартные образцы аскорбиновой кислоты, рутозида, кверцетина, галловой кислоты, кофейной кислоты, хлорогеновой кислоты, лютеолин-7-глюкозида, лимонной кислоты, DL-яблочной кислоты, тиамина и пиридоксина гидрохлорида. Исследование проводили с использованием жидкостного хроматографа Agilent 1260 Infinity II с диодно-матричным детектором. Хроматографическая колонка GL Sciences Inc, Inertsil ODS-3 250 мм × 4,6 мм × 5 мкм, режим подачи подвижной фазы градиентный, аналитическая длина волны 244 нм.

Результаты: аскорбиновая кислота может быть количественно определена в ЛРС и ЛРП методом ВЭЖХ. Надлежащие условия пробоподготовки и хроматографирования позволяют ингибировать процессы окисления аскорбиновой кислоты в водных растворах на время, достаточное для проведения полного испытания (не менее 8 ч).

Выводы: разработана высокочувствительная и селективная методика количественного определения аскорбиновой кислоты методом ВЭЖХ для стандартизации ЛРС/ЛРП, которая может быть рекомендована для включения в ФС «Шиповника плоды» и «Витаминный сбор № 2». Норму содержания аскорбиновой кислоты («не менее 0,2%») в ЛРС/ЛРП «Шиповника плоды» и ЛРП «Витаминный сбор № 2», установленную с помощью титриметрического метода, не рекомендуется снижать при переходе на использование метода ВЭЖХ. Проблема заниженного содержания аскорбиновой кислоты в подавляющем количестве испытуемых образцов шиповника, возможно, связана с использованием низковитаминных видов шиповника секции Rosa caninae, которые должны применяться только как желчегонное средство.

1. Ламан Н, Копылова Н. Шиповник — природный концентрат витаминов и антиоксидантов. Наука и инновации. 2017;10(176):45–9.

2. Novakova L, Solich P, Solichova D. HPLC methods for simultaneous determination of ascorbic and dehydroascorbic acids. Trends Anal Chem. 2008;27(10): 942–58. https://doi.org/10.1016/j.trac.2008.08.006

3. Um M, Kim JW, Lee JW. Optimization of ascorbic acid extraction from Rugosa Rose (Rosa rugosa Thunb.) fruit using response surface methodology and validation of the analytical method. J Korean Wood Sci Technol. 2020;48(3):364–75. https://doi.org/10.5658/WOOD.2020.48.3.364

4. Хасанов ВВ, Дычко КА, Куряева ТТ, Нестерова ЕВ. Определение аскорбиновой кислоты в крови методом ВЭЖХ. Аналитика и контроль. 2013;17(3):322–5.

5. Радждип С, Бхавана П, Храмченко ВЕ. Содержание аскорбиновой кислоты в зеленых, красных и черных листьях бадана толстолистного. Научное обозрение. Педагогические науки. 2019;(4):86–9.

6. Морозов СВ, Ткачева НИ, Ткачев АВ. Проблемы комплексного химического профилирования лекарственных растений. Химия растительного сырья. 2018;(4):5–28. https://doi.org/10.14258/jcprm.2018044003

7. Новрузов АР. Содержание и динамика накопления аскорбиновой кислоты в плодах Rosa canina L. Химия растительного сырья. 2014;(3):221–6. https://doi.org/10.14258/jcprm.1403221