vedomostiregmedРегуляторные исследования и экспертиза лекарственных средствRegulatory Research and Medicine Evaluation3034-30623034-3453Federal State Budgetary Institution ‘Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products’ of the Ministry of Health of the Russian Federation (FSBI ‘SCEEMP’)10.30895/1991-2919-2026-16-4-425-435vedomostiregmed-929Research ArticleГЛАВНАЯ ТЕМА: ВНЕДРЕНИЕ ИНСТРУМЕНТАЛЬНЫХ МЕТОДОВ АНАЛИЗА В КОНТРОЛЕ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВMAIN TOPIC: IMPLEMENTATION OF INSTRUMENTAL METHODS OF ANALYSIS IN QUALITY CONTROL OF MEDICINAL PRODUCTSГадобутрол: разработка и валидация методики определения содержания элементных примесей методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмойGadobutrol: Development and Validation of a Method for Determining the Content of Elemental Impurities Using Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometryhttps://orcid.org/0000-0001-9440-0950ЩукинВ. М.ShchukinV. M.

Щукин Виктор Михайлович, канд. фарм. наук

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Victor M. Shchukin, Cand. Sci. (Pharm.)

8/2 Petrovsky Blvd., Moscow 127051

schukin@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-2125-6174ШвецоваЮ. Н.ShvetsovaYu. N.

Швецова Юлия Николаевна

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Yulia N. Shvetsova

8/2 Petrovsky Blvd., Moscow 127051

shvetsovajn@expmed.ruhttps://orcid.org/0009-0003-0608-7389ЛапинаВ. А.LapinaV. A.

Лапина Варвара Александровна

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Varvara A. Lapina

8/2 Petrovsky Blvd., Moscow 127051

lapinava@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-9133-0835КузьминаН. Е.Kuz'minaN. E.

Кузьмина Наталия Евгеньевна, д-р хим. наук

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Natalia E. Kuz'mina, Dr. Sci. (Chem.)

8/2 Petrovsky Blvd., Moscow 127051

KuzminaN@expmed.ruФедеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияScientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal ProductsRussian Federation202631082026164425435Copyright © Щукин В.М., Швецова Ю.Н., Лапина В.А., Кузьмина Н.Е., 20262026Щукин В.М., Швецова Ю.Н., Лапина В.А., Кузьмина Н.Е.Shchukin V.M., Shvetsova Y.N., Lapina V.A., Kuz'mina N.E.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.vedomostincesmp.ru/jour/article/view/929ВВЕДЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ. Гадобутрол – макроциклический препарат на основе гадолиния, который используется в качестве контрастного вещества при диагностике методом магнитно-резонансной томографии. По фармакопейным требованиям в нем необходимо проводить оценку содержания элементных примесей. Высокие концентрации гадолиния по сравнению с нормируемым содержанием примесей требуют специальных подходов к элементному анализу. 

ЦЕЛЬ

ЦЕЛЬ. Разработка и валидация методики определения элементных примесей в гадобутроле методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Разработку методики проводили на модельных смесях с использованием стандартных образцов анализируемых элементов (Cd, Pb, As, Hg, Co, V, Ni, Tl, Au, Pd, Ir, Os, Rh, Ru, Se, Ag, Pt, Li, Sb, Ba, Mo, Cu, Sn, Cr), варьируя смеси окислителей и способы минерализации. Для приготовления валидационных образцов использовали разбавленный в 200 раз гадобутрол (холостой раствор), к которому добавляли варьируемые количества стандартных образцов элементов. Содержание элементов определяли на масс-спектрометре с индуктивно-связанной плазмой Agilent 7900. При выборе измеряемых изотопов Pt и Se учитывали изобарные интерференции, возникающие из-за высоких концентраций Gd в матрице (¹⁹⁸Pt и ⁸²Se). Для подавления полиатомных интерференций использовали столкновительную ячейку в режиме «с гелием». Для связывания OsO4, использовали следующие стабилизаторы: водные растворы сульфита натрия (7,5 г/л), бисульфита калия (7,5 г/л) и тиомочевины (1 г/л).

РЕЗУЛЬТАТЫ

РЕЗУЛЬТАТЫ. Установлено, что использование Н2О2 не приводит к заметному преимуществу в степени извлечения элементов. Оптимальный вариант пробоподготовки: микроволновая минерализация в смеси азотной и хлористоводородной кислот в соотношении 4:1 при 150 ºС. Наиболее эффективным стабилизирующим агентом для получения корректных результатов определения содержания Os является раствор тиомочевины. Оцененные валидационные параметры (линейность, правильность, повторяемость, внутрилабораторная прецизионность и специфичность) соответствуют фармакопейным критериям приемлемости. Диапазон применения методики позволяет проводить определение всех нормируемых элементов на уровне, определенном фармакопейными требованиями.

ВЫВОДЫ

ВЫВОДЫ. Разработанную и валидированную методику рекомендуется использовать при оценке рисков негативного воздействия элементных примесей, попадающих в организм человека вместе с препаратом «Гадобутрол».

INTRODUCTION

INTRODUCTION. Gadobutrol is a macrocyclic gadolinium-based contrast agent used in diagnostic magnetic resonance imaging (MRI). In accordance with pharmacopeial requirements, the determination of elemental impurities in this substance is mandatory. The high concentration of gadolinium in the matrix, relative to the regulated permissible limits of target impurities, necessitates specialized methodological approaches for elemental analysis.

AIM

AIM. To develop and validate a method for determining elemental impurities in gadobutrol using inductively coupled plasma mass spectrometry.

MATERIALS AND METHODS

MATERIALS AND METHODS. The method was developed using model mixtures containing standard solutions of the elements analyzed (Cd, Pb, As, Hg, Co, V, Ni, Tl, Au, Pd, Ir, Os, Rh, Ru, Se, Ag, Pt, Li, Sb, Ba, Mo, Cu, Sn, and Cr). The oxidant mixtures and digestion methods were varied. Validation samples were prepared using a 200-fold dilution of gadobutrol (blank solution), to which varying amounts of standard solutions of the elements were added. The elemental content was determined using an Agilent 7900 inductively coupled plasma mass spectrometer. When selecting the measured Pt and Se isotopes, isobaric interferences arising from high concentrations of Gd in the matrix (198Pt and 82Se) were taken into account. To suppress polyatomic interference, a collision cell operated in helium mode was used. The following stabilizers were used to bind OsO4: aqueous solutions of sodium sulfite (7.5 g/L), potassium bisulfite (7.5 g/L), and thiourea (1 g/L).

RESULTS

RESULTS. It was found that the use of H2O2 does not result in a significant improvement in element recovery. The optimal sample preparation is microwave digestion in a 4:1 mixture of nitric and hydrochloric acids at 150 °C. Thiourea solution is the most effective stabilizing agent for obtaining accurate Os determination results. The assessed validation parameters (linearity, accuracy, repeatability, within-laboratory precision, and specificity) meet pharmacopeial acceptance criteria. The working range of the method enables the determination of all regulated elements at the levels specified by pharmacopeial requirements.

CONCLUSIONS

CONCLUSIONS. The developed and validated method is recommended for implementation in the assessment of risks associated with the potential adverse effects of elemental impurities introduced into the human body upon administration of the Gadobutrol medicinal product.

гадобутролэлементные примесигадолиниймасс-спектрометрияконтрастные веществаизотопытиомочевинаgadobutrolelemental impuritiesgadoliniummass spectrometrycontrast agentsisotopesthioureaРабота выполнена в рамках государственного задания ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России № 056- 00061-26-00 на проведение прикладных научных исследований (номер государственного учета НИР № 124022300127-0).The study was performed as part of the state assignment of the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products of the Ministry of Health of the Russian Federation (No. 056-00061-26-00) for applied scientific research (R&D state registration No. 124022300127-0).ВВЕДЕНИЕ

Магнитно-резонансная томография (МРТ) — это высокоинформативный неинвазивный метод диагностики, являющийся «золотым стандартом» для исследования мозга, позвоночника, суставов, сосудов и внутренних органов. Для более четкого определения границ и размеров патологий и оценки структуры тканей в МРТ используют контрастные вещества. Чаще всего используют контрастные вещества на основе гадолиния, так как этот элемент обладает специфическими магнитными характеристиками, улучшающими четкость визуализации тканей и органов [1–4]. По литературным данным, ежегодно в мире при проведении диагностических процедур методом МРТ применяют около 63 млн доз препаратов гадолиния [1]. Поскольку гадолиний является токсичным металлом, он присутствует в контрастном веществе в виде хелата, который почти полностью выводится почками, практически не вызывая токсических эффектов [5][6]. Препараты на основе гадолиния представлены линейными и макроциклическими комплексами. В настоящее время предпочтение отдается макроциклическим препаратам на основе гадолиния, поскольку они более стабильны в организме и меньше склонны к высвобождению гадолиния, что снижает риск нежелательных эффектов, а также не проникают через гематоэнцефалический барьер, что минимизирует риск побочных реакций [2][5–9]. Макроциклическим препаратом нового поколения является «Гадобутрол» (Гадовист®), который обладает высокой диагностической эффективностью и безопасностью. В то время как стандартные макроциклические средства имеют концентрацию 0,5 ммоль/мл, гадобутрол выпускается с концентрацией 1,0 ммоль/мл (в 2 раза выше). Это позволяет вводить меньший объем препарата при сохранении высокого контрастного усиления, обеспечивает быстрое выведение препарата [10] и возможность использования для пациентов любого возраста, включая новорожденных1.

На гадобутрол, как и на другие инъекционные лекарственные препараты (ЛП), распространяется требование Государственной фармакопеи Российской Федерации (ГФ РФ)2 по оценке рисков содержания элементных примесей; для оценки уровня их содержания рекомендуется использовать методы фармакопейного элементного анализа3, среди которых наиболее предпочтительным является метод масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ИСП-МС). К преимуществам данного метода относятся повышенная чувствительность, широкий динамический диапазон и оперативность анализа. Метод ИСП-МС позволяет обнаружить следовые количества различных элементов в сложных многокомпонентных матрицах ЛП [11–14].

Цель работы — разработка и валидация методики определения элементных примесей в гадобутроле методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫМатериалы

В качестве объектов исследования использовали препараты «Гадобутрол ВЕЛФАРМ, раствор для внутривенного введения 1 ммоль/мл» производства ООО «Велфарм-М» и «Гадобутрол, раствор для внутривенного введения, 1 ммоль/мл» производства ООО «МОСФАРМ» (Россия).

При проведении исследований использовались следующие реактивы: концентрированная азотная кислота (Cat. No. 6001091, tracemetal grade, 69%, Fisher Chemical, США), концентрированная хлористоводородная кислота (Cat. No. 14261-77, «Химмед», Россия), перекись водорода раствор 30–31% (Cat. No. 845250, Sigma-Aldrich, США), тиомочевина (Cat. No. T7875-5G, Sigma-Aldrich, США), сульфит натрия (Cat. No. 646705, Central Drug House, Индия), калия дисульфит (Cat. No. P2522, Sigma-Aldrich, США), вода деионизованная, очищенная на установке Milli-Q-Integral 3 (Millipore, Франция), аргон высокой чистоты (ТУ 20.11.11-006-45905715-2017, марка «5,5», 99,9995%, ООО «НИИ КМ»).

Были использованы одноэлементные стандартные образцы с аттестованным значением 1000 мг/дм3 (CO1000): Cd (Lot: U2-CD739322), Pb (Lot: V2-PB740044), As (Lot: T2-AS727506), Hg (Lot: V2-HG748947), Co (Lot: V2-CO748612), V (Lot: V2-V743114), Ni (Lot: V2-NI744433), Tl (Lot: T2-TL716970), Au (Lot: X2-AU759490), Pd (Lot: U2-PD731384), Ir (Lot: V2-IR749395), Os (Lot: X2-OS758938), Ru (Lot: U2-RU736766), Se (Lot: U2-SE732725), Ag (Lot: V2-AG746267), Pt (Lot: U2-PT736767), Li (Lot: V2-LI747084), Sb (Lot: W2-SB752548), Mo (Lot: U2-MO737576), Sn (Lot: T2-SN721962), Cr (Lot: T2-CR716104) Inorganic Ventures, CША; Ba (Lot: 15/21К-1-ЦСО ГСО ЦСООВ, Россия), Rh (Lot: HC31518145 Supelco, CША), Cu (Lot: BCCL9950 Sigma-Aidrich, CША).

Для фильтрования растворов перед анализом использовался фильтр «синяя лента» производства «Sartorius» (Германия).

При разработке методики использовали различные смеси окислителей и различные способы минерализации образцов: с помощью термоблока ПЭ-4030 производства ООО «Экохим» (температура разложения 110 ºС, методика Agilent Technologies4) и системой микроволновой пробоподготовки Ethos Up, Millestone, Италия (150 ºС, программа разложения, приведенная в рекомендациях Agilent Technologies5).

Методы

Разработку методики проводили на модельной смеси, которую готовили следующим образом: в мерную колбу на 10 мл добавляли стандартные образцы анализируемых элементов (Cd, Pb, As, Hg, Co, V, Ni, Tl, Au, Pd, Ir, Os, Rh, Ru, Se, Ag, Pt, Li, Sb, Ba, Mo, Cu, Sn, Cr) и доводили до метки раствором гадобутрола (1/200 об/об). Количества добавляемых элементов соответствовали концентрациям 1 ПДК при инъекционном введении препарата6.

Пробоподготовка к масс-спектрометрическому анализу

К 1 мл модельной смеси добавляли 10 мл различных окислительных смесей и проводили минерализацию по методикам, представленным в рекомендациях Agilent Technologies7. Полученные после разложения растворы количественно переносили в мерные колбы объемом 200 мл, предварительно отфильтровав через фильтр беззольный, доводили объем раствора до метки деионизованной водой и перемешивали. Полученный образец направляли на элементный анализ.

Содержание анализируемых элементов определяли на масс-спектрометре с индуктивно связанной плазмой Agilent 7900 (Agilent, США), фиксируя интенсивность сигналов следующих изотопов (а.е.м.): 7Li, 51V, 52Cr, 59Co, 60Ni, 63Cu, 75As, 82Se, 95Mo, 101Ru, 103Rh, 105Pd, 107Ag, 111Cd, 118Sn, 121Sb, 137Ba, 192Os, 193Ir, 196Pt, 197Au, 202Hg, 205Tl, 208Pb. Параметры эксперимента: мощность плазмы — 1550 Вт; поток плазменного газа (аргон) — 15,0 л/мин, поток газа-носителя (аргон) — 1,05 л/мин, поток вспомогательного газа (аргон) — 0,9 л/мин, поток газа столкновительной ячейки (He) — 3 мл/мин, температура распылительной камеры Скотта — 2 °С, скорость подачи образца — 0,1 об/с.

Обработка результатов масс-анализа проводилась автоматически, программным обеспечением масс-спектрометра (MassHunter 4.5).

Валидацию методики проводили в соответствии с фармакопейными требованиями8 по следующим характеристикам: аналитическая область методики (диапазон применения), линейность, правильность, повторяемость, внутрилабораторная прецизионность и специфичность.

Были определены предел обнаружения (ПО) и предел количественного определения (ПКО). Данные величины для каждого элемента в растворе (мкг/л) рассчитывали по формулам (1) и (2) соответственно:

ПО=3,3×S/b, (1)

ПКО=10×S/b, (2)

где S — стандартное отклонение аналитического сигнала (информация из анализа холостого раствора); b — коэффициент чувствительности, представляющий собой отношение аналитического сигнала к определяемой величине (тангенс угла наклона калибровочной кривой). Значения S и b рассчитываются автоматически программным обеспечением масс-спектрометра при построении калибровочного графика.

Для приготовления валидационных образцов и калибровочных растворов использовали разбавленный в 200 раз образец гадобутрола (холостой раствор), к которому добавляли варьируемые количества стандартных образцов определяемых элементов для получения концентраций в диапазоне 40÷160% от номинального значения ПДК без учета разбавления. Для каждого образца определяли среднее значение по результатам трех параллельных измерений (n=15).

Статистическую обработку данных, включая расчет критериев Фишера и Стьюдента, выполняли с помощью программы Microsoft Excel 2007 с подключенным пакетом «Анализ данных». Критерий Фишера применялся для проверки значимости различий степени извлечения (Zi) между дисперсиями двух независимых серий результатов анализа, предварительно прошедших проверку на соответствие закону нормального распределения. Критерий Стьюдента использовался для сравнения средних арифметических значений в указанных сериях измерений.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕРазработка методики

На первом этапе исследования был проведен скрининг содержания элементных примесей в препарате «Гадобутрол» по представленной в литературе методике анализа9 и выбран образец с минимальным уровнем контаминации, который использовали в дальнейшем при разработке и валидации методики. Затем оптимизировали процедуру пробоподготовки, используя комбинации концентрированной азотной кислоты с другими окислителями, так как элементы платиновой группы, включая Pt, Pd, Os, Ir, Ru и Rh, не полностью растворяются при использовании только HNO3 [14][15]. Сравнивали следующие методы пробоподготовки:

1) минерализация с помощью термоблока, окислительная смесь — смесь азотной и хлористоводородной кислот с пероксидом водорода в соотношении 1:3:0,5 (метод 110);

2) микроволновая минерализация, окислительная смесь — смесь азотной и хлористоводородной кислот с пероксидом водорода в соотношении и 4:1:2 (метод 211);

3) микроволновая минерализация в окислительной смеси азотной и хлористоводородной кислот в соотношении 4:1 (метод 3).

При выборе измеряемых изотопов Pt и Se учитывали изобарные интерференции [16][17], возникающие из-за высоких концентраций Gd в матрице. Все изотопы Pt в той или иной степени подвержены спектральному перекрытию с полиатомными частицами, содержащими Gd, однако влияние этих наложений на изотопы 196Pt и 198Pt минимально [18]. Мы выбрали изотоп 196Pt из-за его большей распространенности по сравнению с 198Pt (25,3 и 7,2% соответственно).

Интерференции от двузарядных изотопов гадолиния могут мешать определению всех основных изотопов Se [16][19], за исключением 82Se+, который подвержен полиатомной помехе 40Ar2H2+. Хлорид-ионы, образующиеся при масс-спектрометрическом анализе из-за использования соляной кислоты, вызывают полиатомные интерференции в ICP-MS: для 51V это главным образом 35Cl16O+, а для 75As — 40Ar35Cl+; аналогичные хлорид-зависимые помехи затрагивают и определение 52Cr, также на него оказывает влияние образующийся в органической матрице 40Ar12C+. Хлориды, образующиеся при использовании в эксперименте хлористоводородной кислоты, также вызывают полиатомные интерференции при определении 51V, 52Cr и 75As [20]. Одним из основных способов подавления этих полиатомных интерференций является использование столкновительной ячейки в режиме «с гелием» [20–22].

Результаты оценки открываемости элементов (Zi = (найдено / введено) × 100%), с использованием методов пробоподготовки 1–3 представлены в таблице 1.

Таблица 1. Результаты оценки открываемости методик

Table 1. Results of recovery assessment for the methods

Таблица составлена авторами по собственным данным / The table was prepared by the authors using their own data

ЭлементElementОткрываемостьRecoveryЭлементElementОткрываемостьRecoveryЭлементElementОткрываемостьRecovery
Метод 1Method 1Метод 2Method 2Метод 3Method 3Метод 1Method 1Метод 2Method 2Метод 3Method 3Метод 1Method 1Метод 2Method 2Метод 3Method 3
111Cd73,0±4,291,6±2,387,8±3,5197Au86,9±3,2113,3±2,0100,5±1,2198Pt81,0±6,288,0±4,995,8±5,0
208Pb91,2±5,498,6±3,799,4±4,2105Pd64,5±4,590,5±3,587,3±3,87Li69,3±5,478,5±4,772,6±4,8
75As75,0±6,6101,6±4,9104,3±4,0193Ir70,4±4,0114,8±4,2102,3±5,7121Sb86,2±1,5105,1±2,493,6±1,9
202Hg52,0±6,389,9±3,487,4±4,2192Os112,2±7,8173,3±7,7163,9±8,6137Ba80,7±3,088,8±2,693,2±1,8
59Co94,4±2,088,5±1,893,1±2,5103Rh70,1±4,691,9±3,387,7±3,095Mo79,7±3,886,3±3,1106,9±2,6
51V75,1±8,180,2±5,387,3±5,0101Ru72,9±5,592,6±3,487,6±3,663Cu78,2±3,480,2±2,291,8±2,3
60Ni74,0±2,990,1±2,081,2±4,382Se87,2±4,484,3±3,0100,4±2,4118Sn76,5±3,9102,6±2,999,3±1,8
205Tl80,8±3,186,1±2,487,0±2,8107Ag76,4±7,6109,8±5,5105,8±4,752Cr73,2±2,2104,9±2,9109,6±1,9

Результаты разложения образцов с помощью термоблока (табл. 1) показывают заметные потери анализируемых элементов, связанные, по всей видимости, с двухстадийностью процесса (кислотное разложение и дополнительная стадия с пероксидом водорода) и общей трудоемкостью методики, поэтому предпочтение было отдано микроволновому разложению. Использование пероксида водорода не приводит к заметному преимуществу в степени извлечения элементов, однако усложняет процесс пробоподготовки. В связи с этим в дальнейших исследованиях отказались от использования пероксида водорода и применяли метод пробоподготовки № 3.

Следует отметить, что при микроволновом разложении открываемость осмия не удовлетворяла критериям приемлемости (Zi от 70 до 150%)12. Проблема определения осмия вызвана тем, что этот элемент во время разложения образца может образовывать летучий и токсичный OsO4. Летучая природа этого оксида может привести к неконтролируемым потерям во время подготовки образца или заметному завышению результата из-за «эффекта памяти» [15][23]. Для получения корректных результатов определения содержания Os применяют стабилизацию растворов тиомочевиной [15][21][24], сульфитом натрия [23], дисульфитом калия [23], соляной кислотой13 и сложными смесями реагентов [25][26].

На следующем этапе исследований были изучены различные способы связывания OsO4, рекомендованные N. Takayama с соавт. [23]. Для этого в образцы, минерализованные по методу 3, непосредственно после вскрытия сосуда для разложения добавляли водные растворы сульфита натрия 7,5 г/л (метод 4), бисульфита калия 7,5 г/л (метод 5) и тиомочевины 1 г/л (метод 6). В таблице 2 приведены результаты исследования различных методов стабилизации минерализованного раствора.

Таблица 2. Результаты оценки открываемости методик со стабилизирующими агентами

Table 2. Results of recovery assessment for the methods using stabilizing agents

Таблица составлена авторами по собственным данным / The table was prepared by the authors using their own data

ЭлементElementОткрываемостьRecoveryЭлементElementОткрываемостьRecoveryЭлементElementОткрываемостьRecovery
Метод 4Method 4Метод 5Method 5Метод 6Method 6Метод 4Method 4Метод 5Method 5Метод 6Method 6Метод 4Method 4Метод 5Method 5Метод 6Method 6
111Cd80,3±3,083,7±3,486,9±2,2197Au97,0±2,995,4±2,696,8±2,0196Pt77,0±3,782,9±1,291,8±1,8
208Pb93,7±3,394,0±2,8100,6±2,0105Pd84,2±3,680,0±2,587,1±2,87Li75,3±4,078,7±4,283,0±2,4
75As89,2±3,693,5±5,295,1±3,2193Ir96,5±0,497,2±2,299,0±1,7121Sb85,5±4,479,9±2,798,7±2,2
202Hg91,7±5,389,9±2,792,6±2,3192Os82,6±3,580,3±3,484,2±2,6137Ba86,6±1,989,2±2,492,7±1,0
59Co84,2±2,786,3±2,495,0±1,9103Rh92,0±2,894,8±3,299,7±1,995Mo83,5±3,085,1±2,198,9±2,2
51V75,8±2,480,1±2,784,4±1,5101Ru95,0±1,390,8±2,599,8±2,163Cu88,4±1,392,0±0,9103,5±2,8
60Ni78,4±3,377,9±3,481,8±2,482Se88,8±5,591,8±3,497,6±4,3118Sn82,3±2,586,9±2,9103,7±2,8
205Tl84,3±3,485,7±3,586,2±1,9107Ag93,7±3,990,1±3,791,3±1,652Cr86,9±3,194,1±2,8103,0±2,5

Стабилизация минерализованных растворов тиомочевиной показала наилучшие результаты, при этом концентрация данного стабилизирующего агента (1 г/л) была минимальна, что уменьшает возникающий матричный эффект. Наблюдался несомненный стабилизирующий эффект и от растворов сульфита натрия и бисульфита калия, однако этот эффект достигался при заметно более высокой концентрации (7,5 г/л) данных агентов в испытуемом растворе.

Таким образом, разработанная методика определения элементных примесей в препарате «Гадобутрол» методом ИСП-МС заключается в следующем: к 1 мл препарата добавляют 8 мл концентрированной азотной кислоты и 2 мл концентрированной соляной кислоты, помещают в тефлоновый сосуд для микроволнового разложения и проводят минерализацию при температуре 150 ºС согласно методике Agilent Technologies14. После вскрытия сосудов образец переносят в мерную колбу на 200 мл и доводят водным раствором тиомочевины 1 г/л до метки. Измеряют содержание изотопов анализируемых элементов, указанных в разделе «Материалы и методы». Калибровочные растворы готовят на основе гадобутрола.

Валидация методики

Определение значений ПО и ПКО. По результатам построения калибровочной кривой и анализа холостого раствора были рассчитаны ПО и ПКО (табл. 3).

Таблица 3. Результаты оценки предела обнаружения и предела количественного определения методики

Table 3. Results of the assessment of the limit of detection and limit of quantification for the method

Таблица составлена авторами по собственным данным / The table was prepared by the authors using their own data

Примечание. S/b — отношение стандартного отклонения аналитического сигнала холостого раствора к коэффициенту чувствительности (тангенсу угла наклона калибровочной кривой); ПО — предел обнаружения, ПКО — предел количественного определения.

Note. S/b, ratio of the standard deviation of the analytical signal of the blank solution to the sensitivity coefficient (slope of the calibration curve); LOD, limit of detection; LOQ, limit of quantification.

ЭлементElementПараметрParameterЭлементElementПараметрParameterЭлементElementПараметрParameter
S/bПО, мкг/лLOD, µg/LПКО,мкг/лLOQ, µg/LS/bПО,мкг/лLOD, µg/LПКО,мкг/лLOQ, µg/LS/bПО,мкг/лLOD, µg/LПКО,мкг/лLOQ, µg/L
111Cd0,00260,0090,026197Au0,03400,1120,337196Pt0,12500,4131,238
208Pb0,11800,3891,168105Pd0,02390,0790,2377Li0,18300,6041,812
75As0,31301,0333,099193Ir0,03980,1310,394121Sb0,24020,7932,378
202Hg0,07100,2340,703192Os0,09100,3000,901137Ba1,03203,40610,217
59Co0,01610,0530,159103Rh0,00010,0000,00195Mo0,00790,0260,078
51V0,20480,6762,028101Ru0,00340,0110,03463Cu0,17070,5631,690
60Ni0,44971,4844,45282Se0,87162,8768,629118Sn0,10590,3491,048
205Tl0,00080,0030,008107Ag0,22300,7362,20852Cr0,91403,0169,049

Фармакопейные критерии приемлемости полученных значений ПКО: менее ½ от нормируемой концентрации каждого определяемого элемента15. Согласно полученным данным, валидируемая методика соответствует фармакопейным требованиям к ПКО.

Диапазон применения. Аналитическую область валидируемой методики определили в диапазоне 50÷150% от ПДК каждого из элементов (диапазон определения открываемости16).

Линейность. При оценке линейности определяли зависимость интенсивности сигнала от концентрации элемента в диапазоне 0,5÷1,5 ПДК. Результаты исследования приведены в таблице S4. Результаты оценки линейности валидируемой методики (опубликована на сайте журнала17) и рисунке 1. Полученные данные соответствуют фармакопейным требованиям к линейности методик, основанных на методе ИСП-МС18: коэффициент корреляции r≥0,99 и отношение относительных стандартных отклонений (RSD) для наименьшего и наибольшего уровня калибровки должно лежать в диапазоне 0,5÷2,0.

Рисунок составлен авторами по собственным данным / The figure was prepared by the authors using their own data

Рис. 1. Линейная зависимость интенсивности сигналов анализируемых элементов от их концентрации в валидационных образцах. А — Co, Rh, Pd, Cd, Hg, Pb. B — V, Ag, Ir, Pt, Tl, Os. C — Li, Cr, Cu, Mo, Sn, Ba. D — Ni, As, Se, Ru, Au, Sb. r — коэффициент корреляции; имп./с — импульсов в секунду.

Fig. 1. Linear dependence of the signal intensity on the concentration of the analyzed elements in the validation samples. A: Co, Rh, Pd, Cd, Hg, Pb; B: V, Ag, Ir, Pt, Tl, Os; C: Li, Cr, Cu, Mo, Sn, Ba; D: Ni, As, Se, Ru, Au, Sb. r, correlation coefficient; cps, counts per second.

https://cdn.elpub.ru/assets/journals/vedomostiregmed/2026/4/QhHxSu6R2JGFU5FrpyZhq2AIfcSlwPZX2QiqhW7e.jpeg

Правильность. Правильность методики определяли путем оценки открываемости с использованием валидационных модельных образцов с концентрациями в диапазоне от 0,5 до 1,5 ПДК. Данные по открываемости приведены в таблице S5. Результаты оценки правильности валидируемой методики (опубликована на сайте журнала19). Полученные результаты соответствуют фармакопейным критериям приемлемости (70÷150% для среднего значения 3-х параллельных определений для каждого уровня концентрации)20.

Повторяемость и внутрилабораторную прецизионность оценивали по результатам 3-х определений для каждого из 3-х уровней определяемых величин (нижнего, среднего и верхнего). Критерии приемлемости этих показателей: относительное стандартное отклонение не должно превышать 20% для условий повторяемости и 25% для условий промежуточной (внутрилабораторной) прецизионности21.

Анализ экспериментальных данных (табл. S6. Статистические характеристики повторяемости и внутрилабораторной прецизионности валидируемой методики. Опубликована на сайте журнала22) свидетельствует о полном соответствии результатов оценки этих валидационных характеристик установленным критериям приемлемости для всех определяемых элементов.

Дополнительно оценены значения критериев Фишера и Стьюдента и сравнены с их критическими табличными величинами при числе степеней свободы n=16 и уровне значимости 95% (Fтабл=3,44 и tтабл=2,12).

Рассчитанные значения статистических критериев (табл. S6. Статистические характеристики повторяемости и внутрилабораторной прецизионности валидируемой методики. Опубликована на сайте журнала23) оказались ниже соответствующих табличных порогов. Это подтверждает отсутствие статистически значимых различий между результатами, полученными различными операторами лаборатории, и свидетельствует о высокой воспроизводимости методики.

Значения RSD для условий повторяемости и внутрилабораторной прецизионности не превышали 10%, что значительно ниже фармакопейных требований. Таким образом, валидируемая аналитическая методика характеризуется приемлемым уровнем прецизионности.

Специфичность подтверждена выполнением требования для правильности определения всех элементов. Методика позволяет однозначно оценивать концентрацию каждого элемента на фоне присутствующих в валидационном модельном образце других элементов.

Следует признать, что в ходе данной работы разработка и валидация методики ограничивались рамками исследования элементов основного списка возможных примесей без экстраполяции на требования подраздела «Другие элементы». В частности, в рамках исследования не проводилась оценка содержания примесей редкоземельных элементов, возникающих при выделении Gd [7]. В связи с этим в качестве приоритетной задачи для последующих исследований представляется разработка высокочувствительных аналитических методик для идентификации и количественного определения указанных микропримесей с целью подтверждения их отсутствия или установления допустимых уровней, не влияющих на качество препарата.

Результаты валидационных исследований подтверждают возможность включения разработанной методики в Государственную фармакопею Российской Федерации.

ВЫВОДЫ

1. Разработана методика определения содержания 24 нормируемых элементных примесей в лекарственном препарате «Гадобутрол» методом ИСП-МС, учитывающая изобарные интерференции, возникающие из-за высоких концентраций Gd в матрице, и необходимость стабилизации летучих соединений Os.

2. Подобраны оптимальные условия пробоподготовки (микроволновое разложение в смеси азотной и хлористоводородной кислот, соотношение 4:1) и выбран наиболее подходящий стабилизирующий агент: раствор тиомочевины с концентрацией 1 г/л.

3. В рамках выбранного диапазона применения разработанной методики (50÷150% от значений ПДК) получены удовлетворительные результаты по основным валидационным параметрам (специфичность, величина ПКО, линейность, правильность, прецизионность на уровнях повторяемости и внутрилабораторной прецизионности).

4. Разработанную и валидированную методику рекомендуется использовать при оценке рисков негативного воздействия элементных примесей, попадающих в организм человека вместе с препаратом «Гадобутрол».

Дополнительная информация. Таблицы S4–S6 размещены на сайте журнала «Регуляторные исследования и экспертиза лекарственных средств».

https://doi.org/10.30895/1991-2919-2026-16-4-425-435-table4

https://doi.org/10.30895/1991-2919-2026-16-4-425-435-table5

https://doi.org/10.30895/1991-2919-2026-16-4-425-435-table6

Вклад авторов. Все авторы подтверждают соответствие своего авторства критериям ICMJE. Наибольший вклад распределен следующим образом: В.M. Щукин — поиск и анализ литературных данных, написание текста рукописи; Ю.Н. Швецова — получение экспериментальных данных, обработка результатов; В.А. Лапина — пробоподготовка, получение экспериментальных данных; Н.Е. Кузьмина — дизайн исследования, интерпретация результатов исследования, критический пересмотр текста рукописи.

Использование генеративного искусственного интеллекта. Авторы заявляют, что не использовали генеративный ИИ при подготовке рукописи.

Supplementary information. Tables S4–S6 are available on the website of Regulatory Research and Medicine Evaluation.

https://doi.org/10.30895/1991-2919-2026-16-4-425-435-table4

https://doi.org/10.30895/1991-2919-2026-16-4-425-435-table5

https://doi.org/10.30895/1991-2919-2026-16-4-425-435-table6

Author contributions. All authors confirm that they meet the ICMJE criteria for authorship. The most significant contributions were as follows. Victor M. Shchukin searched and analyzed literature data, drafted the manuscript. Yulia N. Shvetsova acquired experimental data, analyzed the results. Varvara A. Lapina prepared samples, acquired experimental data. Natalia E. Kuz'mina designed the study, interpreted the results, critically revised the manuscript.

Use of generative artificial intelligence. The authors declare that they did not use generative artificial intelligence during the preparation of this manuscript.

1. Bayer получил разрешение для применения препарата Гадобутрол (Гадовист®) в России у детей в возрасте до 2 лет. Качественная клиническая практика. 2024. https://www.clinvest.ru/jour/announcement/view/50432. ОФС.1.1.0040 Элементные примеси. Государственная фармакопея Российской Федерации. XV изд. М.; 2023.3. Там же.4. Whitecotton L, McCurdy CJ, Liba A. Validating performance of an Agilent 7800 ICP-MS for USP < 232>/< 233>.ICH Q3D. Q2 (R1): Elemental impurity analysis in pharmaceuticals. 2023.5. Hussain S, Liba A, McCurdy E. Validating the Agilent 7700x/7800 ICP-MS for the determination of elemental impurities in pharmaceutical ingredients according to draft USP general chapters <232>/<233>. Agilent Technologies; 2015.6. ОФС.1.1.0040 Элементные примеси. Государственная фармакопея Российской Федерации. XV изд. М.; 2023.7. Whitecotton L, McCurdy CJ, Liba A. Validating performance of an Agilent 7800 ICP-MS for USP < 232>/< 233>.Hussain S, Liba A, McCurdy E. Validating the Agilent 7700x/7800 ICP-MS for the determination of elemental impurities in pharmaceutical ingredients according to draft USP general chapters <232>/<233>. Agilent Technologies; 2015.8. ОФС.1.1.0040 Элементные примеси. Государственная фармакопея Российской Федерации. XV изд. М.; 2023.9. Hussain S, Liba A, McCurdy E. Validating the Agilent 7700x/7800 ICP-MS for the determination of elemental impurities in pharmaceutical ingredients according to draft USP general chapters <232>/<233>. Agilent Technologies; 2015.10. Whitecotton L, McCurdy CJ, Liba A. Validating performance of an Agilent 7800 ICP-MS for USP < 232>/< 233>.ICH Q3D. Q2 (R1): Elemental impurity analysis in pharmaceuticals. 2023.11. Hussain S, Liba A, McCurdy E. Validating the Agilent 7700x/7800 ICP-MS for the determination of elemental impurities in pharmaceutical ingredients according to draft USP general chapters <232>/<233>. Agilent Technologies; 2015.12. ОФС.2.1.4.23 Определение примесей элементов. Фармакопея ЕАЭС. 2023.13. Hussain S, Liba A, McCurdy E. Validating the Agilent 7700x ICP-MS for the determination of elemental impurities in pharmaceutical ingredients according to draft USP general chapters. Agilent Technologies; 2011.14. Hussain S, Liba A, McCurdy E. Validating the Agilent 7700x/7800 ICP-MS for the determination of elemental impurities in pharmaceutical ingredients according to draft USP general chapters <232>/<233>. Agilent Technologies; 2015.15. ОФС.1.1.0040 Элементные примеси. Государственная фармакопея Российской Федерации. XV изд. М.; 2023.ОФС.2.1.4.23 Определение примесей элементов. Фармакопея ЕАЭС. 2023.16. ОФС.1.1.0040 Элементные примеси. Государственная фармакопея Российской Федерации. XV изд. М.; 2023.ОФС.2.1.4.23 Определение примесей элементов. Фармакопея ЕАЭС. 2023.17. https://doi.org/10.30895/1991-2919-2026-16-4-425-435-table418. ОФС.1.2.1.1.0015 Масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой. Государственная фармакопея Российской Федерации. XV изд. М.; 2023.19. https://doi.org/10.30895/1991-2919-2026-16-4-425-435-table520. ОФС.1.1.0040 Элементные примеси. Государственная фармакопея Российской Федерации. XV изд. М.; 2023.21. ОФС.1.1.0040 Элементные примеси. Государственная фармакопея Российской Федерации. XV изд. М.; 2023.ОФС.2.1.4.23 Определение примесей элементов. Фармакопея ЕАЭС. 2023.22. https://doi.org/10.30895/1991-2919-2026-16-4-425-435-table623. Там же.

ReferencesQuattrocchi CC, Rovira À., van der Molen AJ, Mallio CA. ESR essentials: Gadolinium-wise MRI – Practice recommendations by the European Society for Magnetic Resonance in Medicine and Biology. Eur Radiol. 2025;35(6):3347–53. https://doi.org/10.1007/s00330-024-11214-4Quattrocchi CC, Rovira À., van der Molen AJ, Mallio CA. ESR essentials: Gadolinium-wise MRI – Practice recommendations by the European Society for Magnetic Resonance in Medicine and Biology. Eur Radiol. 2025;35(6):3347–53. https://doi.org/10.1007/s00330-024-11214-4Islam MT, Tsnobiladze V. The application, safety, and recent developments of commonly used gadolinium-based contrast agents in MRI: A scoping review. Eur Med J. 2024;9(3):63–73. https://doi.org/10.33590/emj/ZRVN2069Islam MT, Tsnobiladze V. The application, safety, and recent developments of commonly used gadolinium-based contrast agents in MRI: A scoping review. Eur Med J. 2024;9(3):63–73. https://doi.org/10.33590/emj/ZRVN2069Shahid I, Joseph A, Lancelot E. Use of real-life safety data from international pharmacovigilance databases to assess the importance of symptoms associated with gadolinium exposure. Invest Radiol. 2022;57(10):664–73. https://doi.org/10.1097/RLI.0000000000000880Shahid I, Joseph A, Lancelot E. Use of real-life safety data from international pharmacovigilance databases to assess the importance of symptoms associated with gadolinium exposure. Invest Radiol. 2022;57(10):664–73. https://doi.org/10.1097/RLI.0000000000000880Uldin H, Davies AM, Botchu R. Changing practices in gadolinium-enhanced direct magnetic resonance arthrography: A UK based survey. Br J Radiol. 2026;99(1177):55–8. https://doi.org/10.1093/bjr/tqaf285Uldin H, Davies AM, Botchu R. Changing practices in gadolinium-enhanced direct magnetic resonance arthrography: A UK based survey. Br J Radiol. 2026;99(1177):55–8. https://doi.org/10.1093/bjr/tqaf285Starekova J. Pirasteh, A. Reeder SB. Update on gadolinium-based contrast agent safety, from the AJR special series on contrast media. AJR Am J Roentgenol. 2024;223(3):e2330036. https://doi.org/10.2214/AJR.23.30036Starekova J. Pirasteh, A. Reeder SB. Update on gadolinium-based contrast agent safety, from the AJR special series on contrast media. AJR Am J Roentgenol. 2024;223(3):e2330036. https://doi.org/10.2214/AJR.23.30036Харламов ВГ, Кулаков ВН, Липенгольц АА, Шимановский НЛ. Стабильность гадолинийсодержащих магнитно-резонансных контрастных средств в присутствии ионов цинка и кальция в различных средах. Вестник Российского государственного медицинского университета. 2016;(1):66–70. https://doi.org/10.24075/brsmu.2016-01-12Kharlamov VG, Kulakov VN, Lipengolts AA, Shimanovskii NL. Stability of gadolinium-based contrast agents in the presence of zinc and calcium ions in different media. Bulletin of RSMU. 2016;(1):66–70 (In Russ.). https://doi.org/10.24075/brsmu.2016-01-12Veiga M, Mattiazzi P, de Gois JS, et al. Presence of other rare earth metals in gadolinium-based contrast agents. Talanta. 2020;216:120940. https://doi.org/10.1016/j.talanta.2020.120940Veiga M, Mattiazzi P, de Gois JS, et al. Presence of other rare earth metals in gadolinium-based contrast agents. Talanta. 2020;216:120940. https://doi.org/10.1016/j.talanta.2020.120940Hoggard N, Roditi GH. T1 hyperintensity on brain imaging subsequent to gadolinium-based contrast agent administration: What do we know about intracranial gadolinium deposition? Br J Radiol. 2017;90(1069):20160590. https://doi.org/10.1259/bjr.20160590Hoggard N, Roditi GH. T1 hyperintensity on brain imaging subsequent to gadolinium-based contrast agent administration: What do we know about intracranial gadolinium deposition? Br J Radiol. 2017;90(1069):20160590. https://doi.org/10.1259/bjr.20160590Шубникова ЕВ, Букатина ТМ, Каперко ДА и др. Постмаркетинговые исследования безопасности лекарственных средств: анализ рекомендаций зарубежных регуляторных органов. Безопасность и риск фармакотерапии. 2018;6(3):130–7. https://doi.org/10.30895/2312-7821-2018-6-3-130-137Shubnikova EV, Bukatina TM, Kaperko DA, et al. Post-marketing drug safety research: Analysis of recommendations of foreign regulators. Safety and Risk of Pharmacotherapy. 2018;6(3):130–7 (In Russ.). https://doi.org/10.30895/2312-7821-2018-6-3-130-137Панов ВО. Шимановский НЛ. Диагностическая эффективность и безопасность макроциклических гадолинийсодержащих магнитно-резонансных контрастных средств. Вестник рентгенологии и радиологии. 2017;98(3):159–66. https://doi.org/10.20862/0042-4676-2017-98-3-159-166Panov VO, Shimanovskiy NL. The diagnostic efficacy and safety of macrocyclic gadolinium-based magnetic resonance contrast agents. Journal of Radiology and Nuclear Medicine. 2017;98(3):159–66 (In Russ.). https://doi.org/10.20862/0042-4676-2017-98-3-159-166Ramamoorthy S. Impurity characterization across drug development stages: analytical methodologies and regulatory perspectives. Pharm Res. 2026;43:1799–1820. https://doi.org/10.1007/s11095-026-04054-yRamamoorthy S. Impurity characterization across drug development stages: analytical methodologies and regulatory perspectives. Pharm Res. 2026;43:1799–1820. https://doi.org/10.1007/s11095-026-04054-yHarrington JM, Seibert DS, Williams G, et al. The Product Quality Research Institute elemental impurity interlaboratory study: Results and implications for industry. J Trace Elem Miner. 2025;12:100227. https://doi.org/10.1016/j.jtemin.2025.100227Harrington JM, Seibert DS, Williams G, et al. The Product Quality Research Institute elemental impurity interlaboratory study: Results and implications for industry. J Trace Elem Miner. 2025;12:100227. https://doi.org/10.1016/j.jtemin.2025.100227Швецова ЮН, Ерина АА, Щукин ВМ, Кузьмина НЕ. Разработка и валидация методики определения элементных примесей в флудезоксиглюкозе (18F) методом масс-спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой. Регуляторные исследования и экспертиза лекарственных средств. 2025;15(4):444–50. https://doi.org/10.30895/1991-2919-2025-15-4-444-450Shvetsova YuN, Erina AA, Shchukin VM, Kuz’mina NE. Elemental impurity detection tech-nique in fluorodeoxyglucose (18F) using inductively coupled plasma mass spectrometry: Development and validation. Regulatory Research and Medicine Evaluation. 2025;15(4):444–50 (In Russ.). https://doi.org/10.30895/1991-2919-2025-15-4-444-450Korbi I, Menta M, Verdeil J, et al. Rapid and precise determination of elemental impurities in pharmaceutical products by ICP-MS using combined standard addition and isotope dilution methods. Microchem J. 2025;217:114785. https://doi.org/10.1016/j.microc.2025.114785Korbi I, Menta M, Verdeil J, et al. Rapid and precise determination of elemental impurities in pharmaceutical products by ICP-MS using combined standard addition and isotope dilution methods. Microchem J. 2025;217:114785. https://doi.org/10.1016/j.microc.2025.114785Gu X, Zhu S, Yan L, et al. Development of a sample preparation method for accurate analysis of 24 elemental impurities in oral drug products by ICP-MS according to USP/ICH guidelines. J Anal At Spectrom. 2021;36(3):512–7. https://doi.org/10.1039/D0JA00519CGu X, Zhu S, Yan L, et al. Development of a sample preparation method for accurate analysis of 24 elemental impurities in oral drug products by ICP-MS according to USP/ICH guidelines. J Anal At Spectrom. 2021;36(3):512–7. https://doi.org/10.1039/D0JA00519CWilschefski S, Baxter M, Pool G. A simple equation to correct for gadolinium interference on plasma selenium measurement using inductively coupled plasma mass spectrometry. Ann Clin Biochem. 2020;57(3):234–41. https://doi.org/10.1177/0004563220922561Wilschefski S, Baxter M, Pool G. A simple equation to correct for gadolinium interference on plasma selenium measurement using inductively coupled plasma mass spectrometry. Ann Clin Biochem. 2020;57(3):234–41. https://doi.org/10.1177/0004563220922561Steuerwald AJ, Parsons PJ, Arnason JG, et al. Trace element analysis of human urine collected after administration of Gd-based MRI contrast agents: characterizing spectral interferences using inorganic mass spectrometry. J Anal At Spectrom. 2013;28(6):821–30. https://doi.org/10.1039/C3JA30331DSteuerwald AJ, Parsons PJ, Arnason JG, et al. Trace element analysis of human urine collected after administration of Gd-based MRI contrast agents: characterizing spectral interferences using inorganic mass spectrometry. J Anal At Spectrom. 2013;28(6):821–30. https://doi.org/10.1039/C3JA30331DDay P, Erdahl S, Eckdahl S, et al. Gadolinium-based contrast agents: A clinically significant analytical interference in inductively coupled plasma mass spectrometry elemental analysis. Ann Clin Biochem. 2019;56(6):638–45. https://doi.org/10.1177/0004563219856031Day P, Erdahl S, Eckdahl S, et al. Gadolinium-based contrast agents: A clinically significant analytical interference in inductively coupled plasma mass spectrometry elemental analysis. Ann Clin Biochem. 2019;56(6):638–45. https://doi.org/10.1177/0004563219856031Walter A, Nelms S, Harrington CF, Taylor A. Interference of gadolinium on the measurement of selenium in human serum by inductively coupled plasma-quadrupole mass spectrometry. Ann Clin Biochem. 2011;48(2):176–7. https://doi.org/10.1258/acb.2010.010030Walter A, Nelms S, Harrington CF, Taylor A. Interference of gadolinium on the measurement of selenium in human serum by inductively coupled plasma-quadrupole mass spectrometry. Ann Clin Biochem. 2011;48(2):176–7. https://doi.org/10.1258/acb.2010.010030Mazurova I, Khvaschevskaya A, Guseva N. The choice of conditions for the determination of vanadium, chromium and arsenic concentration in waters by ICP-MS using collision mode. Procedia Chem. 2015;15:201–5. https://doi.org/10.1016/j.proche.2015.10.032Mazurova I, Khvaschevskaya A, Guseva N. The choice of conditions for the determination of vanadium, chromium and arsenic concentration in waters by ICP-MS using collision mode. Procedia Chem. 2015;15:201–5. https://doi.org/10.1016/j.proche.2015.10.032Radić I, Runje M, Cvetnić M, et al. Validation of the ICP-MS method for determination of trace elements provided by ICH Q3D guideline in fosamprenavir calcium. Kem Ind. 2021;70(11–12):701–9. https://doi.org/10.15255/KUI.2021.004Radić I, Runje M, Cvetnić M, et al. Validation of the ICP-MS method for determination of trace elements provided by ICH Q3D guideline in fosamprenavir calcium. Kem Ind. 2021;70(11–12):701–9. https://doi.org/10.15255/KUI.2021.004Harrington CF, Walter A, Nelms S, Taylor A. Removal of the gadolinium interference from the measurement of selenium in human serum by use of collision cell quadrupole inductively coupled plasma mass spectrometry (Q-ICP-MS). Ann Clin Biochem. 2014;51(Pt 3):386–91. https://doi.org/10.1177/0004563213504386Harrington CF, Walter A, Nelms S, Taylor A. Removal of the gadolinium interference from the measurement of selenium in human serum by use of collision cell quadrupole inductively coupled plasma mass spectrometry (Q-ICP-MS). Ann Clin Biochem. 2014;51(Pt 3):386–91. https://doi.org/10.1177/0004563213504386Takayama N, Yoneda T, Takebayashi K, et al. Stabilizers for osmium isotopes in microwave-irradiated acid digestion and inductively coupled plasma mass spectrometry analysis. Chem Pharm Bull (Tokyo). 2022;70(1):57–65. https://doi.org/10.1248/cpb.c21-00739Takayama N, Yoneda T, Takebayashi K, et al. Stabilizers for osmium isotopes in microwave-irradiated acid digestion and inductively coupled plasma mass spectrometry analysis. Chem Pharm Bull (Tokyo). 2022;70(1):57–65. https://doi.org/10.1248/cpb.c21-00739Venzago C, Popp M, Kovac J, Kunkel A. Pharmacopeial requirements for elemental impurities: a novel approach to the trace determination of osmium by oxidative pressure vessel sample digestion and measurement using inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP MS) after complexation and stabilisation. J Anal At Spectrom. 2013;28(7):1125–9. https://doi.org/10.1039/C3JA50040CVenzago C, Popp M, Kovac J, Kunkel A. Pharmacopeial requirements for elemental impurities: a novel approach to the trace determination of osmium by oxidative pressure vessel sample digestion and measurement using inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP MS) after complexation and stabilisation. J Anal At Spectrom. 2013;28(7):1125–9. https://doi.org/10.1039/C3JA50040CLiu JH, Deng XD, Li J et al. A novel approach to achieve Os isotope equilibration under ambient conditions for negative thermal ionization mass spectrometry (N-TIMS) analysis. J Anal At Spectrom. 2025;40(10):2641–8. https://doi.org/10.1039/D5JA00151JLiu JH, Deng XD, Li J et al. A novel approach to achieve Os isotope equilibration under ambient conditions for negative thermal ionization mass spectrometry (N-TIMS) analysis. J Anal At Spectrom. 2025;40(10):2641–8. https://doi.org/10.1039/D5JA00151JCauduro VH, Henn AS, Bizzi CA, et al. Determination of osmium and other platinum group elements in active pharmaceutical ingredients by ICP-MS. At Spectrosc. 2024;45(5):373–80. https://doi.org/10.46770/AS.2024.178Cauduro VH, Henn AS, Bizzi CA, et al. Determination of osmium and other platinum group elements in active pharmaceutical ingredients by ICP-MS. At Spectrosc. 2024;45(5):373–80. https://doi.org/10.46770/AS.2024.178

The authors declare that there are no conflicts of interest present.