vedomostiregmedРегуляторные исследования и экспертиза лекарственных средствRegulatory Research and Medicine Evaluation3034-30623034-3453Federal State Budgetary Institution ‘Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products’ of the Ministry of Health of the Russian Federation (FSBI ‘SCEEMP’)10.30895/1991-2919-2023-575vedomostiregmed-575Research ArticleЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯHERBAL MEDICINAL PRODUCTSТехнология получения и оценка качества микрокапсул сухого экстракта травы зюзника европейского (Lycopus europaeus L.)Production Technology and Quality Assessment of Microcapsules of Lycopus europaeus L. Herb Dry Extracthttps://orcid.org/0000-0002-2611-4490СемкинаО. А.SemkinaO. A.
Семкина Ольга Александровна, канд. фарм. наук
Ул. Грина, д. 7, стр. 1, Москва, 117216
Olga A. Semkina, Cand. Sci. (Pharm.)
7/1 Grin St., Moscow 117216
semkina@vilarnii.ruhttps://orcid.org/0000-0003-1743-1176БелошапкинаО. М.BeloshapkinaO. M.
Белошапкина Ольга Михайловна
Ул. Грина, д. 7, стр. 1, Москва, 117216
Olga M. Beloshapkina
7/1 Grin St., Moscow 117216
olga.beloshap@mail.ruФедеральное государственное бюджетное научное учреждение «Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений» (ВИЛАР) Министерства науки и высшего образования Российской ФедерацииРоссияAll-Russian Scientific Research Institute of Medicinal and Aromatic Plants (VILAR)Russian Federation2024280220241417280Copyright © Семкина О.А., Белошапкина О.М., 20242024Семкина О.А., Белошапкина О.М.Semkina O.A., Beloshapkina O.M.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.vedomostincesmp.ru/jour/article/view/575АКТУАЛЬНОСТЬ
АКТУАЛЬНОСТЬ. Гигроскопичность и низкая сыпучесть субстанции являются одной из проблем при производстве лекарственных препаратов на основе растительных экстрактов. Микрокапсулирование сухих экстрактов позволяет снизить их гигроскопичность, улучшить характеристики сыпучести и расширить область применения таких субстанций. Сравнительный анализ качества полученных микрочастиц в зависимости от выбранного метода микрокапсулирования необходим для последующей разработки лекарственных препаратов.
ЦЕЛЬ
ЦЕЛЬ. Апробация разработанной ранее технологии получения микрокапсул и оценка качества микрочастиц сухого экстракта травы зюзника европейского.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Объектом исследования являлся сухой экстракт травы зюзника европейского, обладающий тиреостатическим действием. Микрокапсулирование проводилось методом диспергирования. Для формирования оболочек микрокапсул использован пленкообразователь — желатин марки П-11. Оценка характеристик полученных микрокапсул выполнена в соответствии с фармакопейными показателями качества: размер частиц, влажность, сыпучесть. Качественный и количественный анализ сухого экстракта травы зюзника европейского проводились методами тонкослойной хроматографии и спектрофотометрии.
РЕЗУЛЬТАТЫ
РЕЗУЛЬТАТЫ. Подобраны оптимальные соотношения сухого экстракта, вспомогательных веществ и способа их введения при микрокапсулировании. Полученные микрокапсулы представляют собой однородные частицы размером 50–300 мкм с влажностью 3,21±0,12% и хорошей сыпучестью. Эффективность инкапсулирования при использовании метода диспергирования достигает 95,0±1,3%. Микрокапсулированные частицы экстракта в отличие от сухого экстракта обладают сферической формой, гладкой поверхностью и улучшенными технологическими показателями.
ВЫВОДЫ
ВЫВОДЫ. Разработана технология микрокапсулирования сухого экстракта травы зюзника европейского. Результаты проведенных исследований подтвердили эффективность применения метода микрокапсулирования для снижения гигроскопичности сухого экстракта травы зюзника европейского и повышения его стабильности в процессе хранения, что позволит оптимизировать дальнейшую разработку лекарственных форм.
SCIENTIFIC RELEVANCE
SCIENTIFIC RELEVANCE. The high hygroscopicity and poor flowability of herbal extracts complicate the manufacturing of medicinal products based on these active substances. Microencapsulation of dry herbal extracts reduces their hygroscopicity, improves their flowability, and expands their applicability. Further development of medicinal products based on herbal extracts requires a comparative analysis of the relationships between the quality of microparticles and the selected microencapsulation method.
AIM
AIM. This study aimed to conduct a practical evaluation of a previously developed microcapsule production technology and to evaluate the quality of a microencapsulated dry extract of Lycopus europaeus L. herb.
MATERIALS AND METHODS
MATERIALS AND METHODS. The study analysed a dry extract of Lycopus europaeus herb with a thyrostatic effect, which was microencapsulated by dispersion. A film-forming agent was used to form the microcapsule shells (gelatine, grade P-11). The microcapsules were characterised by the following pharmacopoeial quality parameters: particle size, moisture content, and flowability. The qualitative and quantitative analysis of the dry extract of Lycopus europaeus herb used thin-layer chromatography and spectrophotometry.
RESULTS
RESULTS. The study identified the optimum ratios for Lycopus europaeus herb dry extract and excipients as well as the procedure for ingredient addition during the microencapsulation process. The resulting microcapsules were homogeneous particles with a diameter of 50–300 µm, a moisture content of 3.21±0.12%, and a good flow. The encapsulation efficiency of the dispersion method reached 95.0±1.3%. In contrast to non-encapsulated dry extract particles, the particles of microencapsulated Lycopus europaeus herb dry extract had a spherical shape, smooth surface, and improved technological properties.
CONCLUSIONS
CONCLUSIONS. The authors developed a microencapsulation technology for Lycopus europaeus herb dry extract. The study results confirmed the efficiency of the microencapsulation method in reducing the hygroscopicity of Lycopus europaeus herb dry extract, increasing its stability during storage, and optimising the further development of dosage forms.
микрокапсулированиемикрокапсулысухой экстрактзюзник европейскийтехнология инкапсулированияпоказатели качества микрочастицmicroencapsulationmicrocapsulesdry extractLycopus europaeusmicroencapsulation technologymicroparticle quality parametersРабота выполнена в рамках государственного задания федерального государственного бюджетного научного учреждения «Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений» (номер государственного учета НИР в системе ЕГИСУ НИОКР № FGUU-2022-0011)The study reported in this publication was carried out as part of publicly funded research project of the All-Russian Scientific Research Institute of Medicinal and Aromatic Plants (VILAR) registered in the Unified State Information System for Recording the Research, Development, and Technological Works for Civil Purposes under R&D reporting No. FGUU-2022-0011Введение
В условиях повышенного интереса к отечественному лекарственному растительному сырью1 и лекарственным препаратам растительного происхождения актуальными являются поиск и разработка методов производства, способствующих сохранению физико-химических и технологических свойств субстанций, в том числе сухих экстрактов. Сухие экстракты растительного происхождения характеризуются широким спектром фармакологической активности, хорошей переносимостью и низкой вероятностью возникновения побочных эффектов [1].
В Центре химии и фармацевтической технологии ФГБНУ ВИЛАР получен и стандартизован сухой экстракт травы зюзника европейского (Lycopus europaeus L.). Биологически активные вещества (розмариновая, кофейная, литоспермовая кислоты, инозид, лютеолин, эпигенин и др.), содержащиеся в экстракте зюзника европейского, оказывают выраженное тиреостатическое действие. По данным литературы, при введении в желудок лабораторных животных экстракт зюзника европейского оказывает седативный эффект и дозозависимое гипотиреоидное действие, связанное в основном с присутствием в экстракте розмариновой кислоты [2, 3].
Определение токсикологической характеристики экстракта, проведенное на мышах линии BALB/c и крысах Wistar обоего пола, показало, что фармацевтическая субстанция относится к классу малотоксичных веществ в соответствии с классификацией веществ по ГОСТ 12.1.007-762 [4].
Одной из проблем производства лекарственных препаратов на основе растительных экстрактов является гигроскопичность и низкая сыпучесть субстанции. Микрокапсулирование сухих экстрактов позволяет снизить гигроскопичность, улучшить характеристики сыпучести и расширить область применения полученных субстанций.
Существует более десяти методов микрокапсулирования, применяющихся для получения микрочастиц субстанций растительного происхождения: диспергирование, ионное гелеобразование, коацервация, распылительная сушка и др. [5, 6]. Для получения микрокапсул могут быть использованы не только отдельные методы, но и их комбинации, например последовательное применение методов диспергирования и распылительной сушки или метода коацервации совместно с лиофильной сушкой [7, 8].
Цель работы — апробация разработанной ранее технологии получения микрокапсул и оценка показателей качества микрочастиц сухого экстракта травы зюзника европейского.
Задачами исследования были получение микрокапсулированной формы экстракта травы зюзника европейского и оценка качества полученных частиц по показателям: влажность, подлинность, размер частиц, сыпучесть, угол естественного откоса, насыпная плотность.
Материалы и методы
Сухой экстракт травы зюзника европейского — аморфный порошок от светло-коричневого до зеленовато-коричневого цвета, специфического запаха. Для сухого экстракта характерна гигроскопичность и низкая сыпучесть. Сухой экстракт представлен частицами различной формы и размера, а именно: пластинами, параллелепипедами, овалами с неровными краями и шероховатой поверхностью. Размеры таких частиц варьируют от 10 до 100 мкм. Количественное содержание суммы фенольных соединений в пересчете на розмариновую кислоту в сухом экстракте составляет 7,2±0,4%. Сухой экстракт травы зюзника европейского растворим в воде очищенной, спирте этиловом 40%, частично растворим в маслах [9].
Вспомогательные вещества и растворители: желатин пищевой марки П-11 (ООО ТД «ХИММЕД»), глицерин (ч.д.а., ООО «АЛЬДОСА», кат. № 01.0.0.0208.02), алюминий хлористый 6-водный (квалификации BP/USP, ООО «АЛЬДОСА», кат. № 01.0.8.0007.07), кальций хлористый безводный (ч., ООО «АЛЬДОСА», кат. № 01.0.0.0451.07), этилацетат (х.ч., ООО «АЛЬДОСА», кат. № 01.0.3.0610.02), уксусная кислота ледяная (х.ч., ООО «АЛЬДОСА», кат. № 01.1.8.0620.02), масло вазелиновое (ФС.2.2.0004.15), масло терпентинное эфирное очищенное (ЛСР-002305/07, ФС.3.4.0014.18), вода очищенная (ФС 2.2.0020.18), спирт этиловый 96% (ФС 2.1.0036.15).
При получении микрокапсул использовали верхнеприводную мешалку RW 20 digital (IKA), вакуумный сушильный шкаф СНВС-25/3,5М (ООО «Тула-Терм»). Для определения потери в массе при высушивании объектов использовали анализатор влажности ML-50 (AND)3. Определение сыпучести проводили по скорости истечения из воронки с диаметром 10 мм4. Определение визуальных характеристик частиц проводили с использованием микроскопа цифрового МИКМЕД LCD 1000Х 2.0L (АО «ЛОМО»). Распределение частиц по размеру оценивали с использованием лазерного анализатора размера частиц Bettersizer SD (Bettersize)5. Количественное определение суммы фенольных соединений осуществляли на спектрофотометре Cary 100 Scan (Varian). Качественный анализ проводили методом тонкослойной хроматографии, пластинки Polyamide 11 F254 (Merck, кат. № 5557) размером 20×20 см в системе растворителей: этилацетат — концентрированная уксусная кислота — вода в объемном соотношении 5:1:1. В качестве образца сравнения использовали розмариновую кислоту (96%, Sigma-Aldrich, кат. № 536954).
При обработке полученных в ходе экспериментов результатов применяли метод вариационно-статистического анализа с оценкой значимости различий по критерию Стьюдента6.
Результаты и обсуждение
Для микрокапсулирования сухого экстракта травы зюзника европейского был выбран метод диспергирования. Выбор проведен с учетом физико-химических свойств субстанции, доступности способа получения микрокапсул, простоты аппаратного оформления и высокой производительности метода. Технологический процесс по методу диспергирования предполагает несколько этапов. На первом этапе получают раствор, содержащий пленкообразователь и активную действующую субстанцию (дисперсная фаза). На втором этапе при добавлении гидрофобной жидкости (дисперсионная среда — вазелиновое масло) образуются мягкие микрочастицы. На третьем этапе частицам придается упругость — при изменении температурного режима (охлаждение системы) затвердевает пленкообразующий материал.
Наиболее сложным является этап получения дисперсионной системы, для проведения которого важен выбор температурного режима, соотношения фазы и среды, скорости оборотов мешалки. Выбор условий для осуществления инкапсулирования на следующем этапе индивидуален и зависит не только от физико-химических свойств сухого экстракта и вспомогательных веществ, но и от используемых растворителей, а также ожидаемых формы и размера частиц, получаемых в результате инкапсулирования [10].
Для получения микрокапсул методом диспергирования в качестве пленкообразователя выбран желатин. Оптимальная концентрация желатина для предложенной технологии составляет 35–50% и зависит от формы выпуска желатина (порошок, гранулы, пластины), марки желатина и силы (прочности) геля желатина, которая определяется по методу Блюма7 и находится в пределах от 180 до 220 единиц. Если сила (прочность) геля используемого желатина менее 180 единиц, то сформированные микрочастицы могут слипаться на стадии охлаждения, что не позволит получить частицы размером менее 500 мкм. Если сила (прочность) геля используемого желатина выше 220 единиц, то процесс диспергирования осложнен неспособностью раствора к диспергированию при необходимой для получения микрочастиц температуре. Таким образом, для получения микрокапсул экстракта зюзника европейского был выбран желатин марки П-11.
В ходе эксперимента был разработан способ введения в липофильную среду сухого экстракта травы зюзника европейского — с предварительным растворением экстракта в растворе пленкообразователя — желатина. Полученную систему, содержащую экстракт и вспомогательные вещества, диспергировали с использованием мешалки (600 rpm, 50 °С) в присутствии масла вазелинового с последующим охлаждением системы до 0 °С. После охлаждения полученные частицы освобождали от дисперсионной среды и высушивали при температуре 35 °С в вакуумном сушильном шкафу. Технологическая схема получения микрокапсул представлена на рисунке 1.
Оценку качества полученных микрокапсул проводили по следующим показателям8: размер частиц, форма частиц, влажность, качественный анализ, угол естественного откоса, сыпучесть, насыпная плотность. Полученные результаты представлены в таблице 1.
Эффективность инкапсулирования (Эи, %) определяли на основании результатов спектрофотометрического анализа суммы фенольных соединений в пересчете на розмариновую кислоту и рассчитывали по формуле:
(1)
где Х0 — количество введенного в систему экстракта, Х — потери.
Методом диспергирования были получены микрочастицы диаметром 50–300 мкм, сферической формы с гладкой поверхностью (рис. 2). Рассчитанная по формуле (1) эффективность инкапсулирования составила 95,0±1,3% при влажности микрочастиц — 3,21±0,12%. Для исследования качественного состава полученных микрокапсул на линию старта хроматографической пластинки наносили 40 мкл спиртового извлечения сухого экстракта травы зюзника европейского 1%, 5 мкл спиртового раствора розмариновой кислоты 0,1% и 40 мкл спиртового извлечения микрокапсул сухого экстракта травы зюзника европейского 3%. На хроматограмме испытуемого раствора в ультрафиолетовом свете наблюдали светло-голубую зону адсорбции с Rf около 0,33, соответствующую аналогичной зоне адсорбции раствора розмариновой кислоты (рис. 3).
На рисунке 4 представлены интегральные кривые, отображающие распределение частиц экстракта по размерам. Средний размер частиц в образце сухого экстракта (D50) в соответствии с результатами проведенного исследования составил 65,1 мкм, для микрокапсулированной формы сухого экстракта D50 = 140,7 мкм. Полученные данные подтверждают, что для микрокапсулированной формы сухого экстракта характерны более крупные однородные по форме частицы, чем для некапсулированного сухого экстракта, содержащего значительную долю пылевой фракции (твердые частицы различной формы размером < 50 мкм).
В результате проведенного сравнительного анализа показано, что микрокапсулы экстракта травы зюзника европейского имеют сферическую форму, гладкую поверхность, обладают хорошей сыпучестью и значительно отличаются по своим технологическим характеристикам (табл. 1, рис. 4) от сухого экстракта. Преимуществами микрокапсулированной формы экстракта являются его технологичность в процессе получения лекарственных препаратов и отсутствие гигроскопичности, свойственной субстанции растительного происхождения.
Рисунок подготовлен авторами / The figure is prepared by the authors
Рис. 1. Технологическая схема получения микрокапсул сухого экстракта травы зюзника европейского методом диспергирования. Кт — контроль технологический, Кх — контроль химический
Fig. 1. Process flow diagram for the production of microcapsules of Lycopus europaeus herb dry extract by dispersion. Tc, technological control; Cc, chemical control
Fig. 3. Chromatogram of Lycopus europaeus herb dry extract (1), rosmarinic acid standard (2), and microcapsules of Lycopus europaeus herb dry extract (3) in UV light (a) and as a scheme (b)
Рисунок подготовлен авторами по собственным данным / The figure is prepared by the authors using their own data
Рис. 4. Интегральное распределение частиц сухого экстракта травы зюзника европейского (1) и его микрокапсулированной формы (2) по размеру. D10, D50, D90 — размер частиц (мкм), соответствующий объемной доле 10, 50, 90% соответственно
Fig. 4. Cumulative curves of particle size distribution of Lycopus europaeus herb dry extract (1) and its microencapsulated form (2). D10, D50, and D90 are particle sizes (μm) corresponding to a volume fraction of 10, 50, and 90%, respectively
Методом диспергирования получены микрочастицы сухого экстракта травы зюзника европейского, в качестве вспомогательного вещества использован желатин марки П-11. Проведена оценка качества полученных микрокапсул по следующим показателям: размер и форма микрочастиц, подлинность (методом тонкослойной хроматографии), эффективность инкапсулирования, влажность, угол естественного откоса, сыпучесть, насыпная плотность. Микрокапсулы экстракта представляют собой однородные частицы размером 50–300 мкм с влажностью 3,21±0,12%, хорошей сыпучестью. Эффективность инкапсулирования при использовании метода диспергирования достигает 95,0±1,3%, что позволяет сделать вывод о возможности использования разработанной технологии для получения микрокапсулированных лекарственных препаратов растительного происхождения.
1 Указ Президента Российской Федерации от 19.04.2017 № 176 «О Стратегии экологической безопасности Российской Федерации на период до 2025 года».
2 ГОСТ 12.1.007-76 Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности. М.; 1990.
3 ОФС.1.5.3.0007.15 Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV изд. Т. 2. М.; 2018.
4 ОФС.1.4.2.0016.15 Степень сыпучести порошков. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV изд. Т. 2. М.; 2018.
5 ОФС.1.2.1.0008.15 Определение распределения частиц по размеру методом лазерной дифракции света. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV изд. Т. 1. М.; 2018.
6 ОФС.1.1.0013.15 Статистическая обработка результатов химического эксперимента. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV изд. Т. 1. М.; 2018.
7 ГОСТ 11293-2017 Желатин. Технические условия. М.; 2020.
8 ОФС.1.4.1.0010.15 Порошки. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV изд. Т. 2. М.; 2018.ОФС.1.4.1.0021.15 Экстракты. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV изд. Т. 2. М.; 2018.
ReferencesJităreanu A, Trifan A, Vieriu M, Caba I-C, Mârțu I, Agoroaei L. Current trends in toxicity assessment of herbal medicines: a narrative review. Processes. 2023;11(1):83. https://doi.org/10.3390/pr11010083Jităreanu A, Trifan A, Vieriu M, Caba I-C, Mârțu I, Agoroaei L. Current trends in toxicity assessment of herbal medicines: a narrative review. Processes. 2023;11(1):83. https://doi.org/10.3390/pr11010083Крепкова ЛВ, Бабенко АН, Лемясева СВ, Боровкова МВ, Кузина ОС. Некоторые аспекты доклинического изучения безопасности зюзника европейского (Lycopus europaeus L.) экстракта сухого. Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2020;23(8):40–7. https://doi.org/10.29296/25877313-2020-08-06Krepkova LV, Babenko АN, Lemyaseva SV, Вorovkova MV, Kuzina OS. Some aspects of pre-clinical study of safety оf the Lycopus europaeus L. dry extract. Problems of Biological, Medical and Pharmaceutical Chemistry. 2020;23(8):40−7 (In Russ.). https://doi.org/10.29296/25877313-2020-08-06Лупанова ИА, Крепкова ЛВ, Ферубко ЕВ, Трумпе ТЕ, Бортникова ВВ, Бабенко АН и др. Новые лекарственные средства растительного происхождения ВИЛАР. М.: ФГБНУ ВИЛАР; 2021. EDN: DJSFKWLupanova IA, Krepkova LV, Ferubko EV, Trumpe TE, Bortnikova VV, Babenko АN, et al. New herbal medicines of VILAR. Moscow: FGBNU VILAR; 2021 (In Russ.). EDN: DJSFKWКузина ОС, Боровкова МВ, Крепкова ЛВ. Токсикологическая характеристика зюзника европейского (Lycopus europaeus L.) и зюзника высокого (Lycopus exaltatus L.) травы экстрактов сухих в условиях «острого» опыта. В кн.: Сборник трудов II Международной научной конференции «Роль метаболомики в совершенствовании биотехнологических средств производства». М.; 2019. С. 131–5. EDN: ECOXZMKuzina OS, Borovkova MV, Krepkova LV. Toxicological characterization of the Lycopus europaeus L. and Lycopus exaltatus L. dry extracts in the acute experience. In: Collection of proceedings of the II International Scientific Conference “Role of metabolomics in improving biotechnological means of production”. Moscow; 2019. P. 131–5 (In Russ.). EDN: ECOXZMАвтина НВ, Писарев ДИ, Новиков ОО, Томчаковская ЕА, Безменова МД. Разработка состава и технологии микрокапсул с экстрактом черемухи поздней. Современные проблемы науки и образования. 2012;(4):304. EDN: PBITLFAvtina NV, Pisarev DI, Novikov OO, Tomchakovskaya EA, Bezmenova MD. Development of technology microcapsules with an extract of Padus serotina. Modern Problems of Science and Education. 2012;(4):304 (In Russ.). EDN: PBITLFБелошапкина ОМ, Семкина ОА. Разработка технологии получения микрокапсул сухого экстракта травы зюзника европейского (Lycopus europaeus L.). В кн.: Сборник трудов Х Международной научно-практической конференции молодых ученых «Современные тенденции развития технологий здоровьесбережения». Москва; 2022. С. 357–60. https://doi.org/10.52101/9785870191058_357Beloshapkina OM, Semkina OA. Development of technology for obtaining microcapsules of dry herbal extract of Lycopus europaeus. In: Proceedings of X International Scientific Conference of Young Scientists “Current trends in the development of healthcare technologies”. Moscow; 2022. P. 357–60 (In Russ.). https://doi.org/10.52101/9785870191058_357Семкина ОА, Джавахян МA, Белошапкина ОМ, Громакова АИ. Технологические аспекты получения микрокапсул субстанций растительного происхождения. Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2021;24(5):5–14. https://doi.org/10.29296/25877313-2021-05-01Semkina OA, Dzhavakhyan MA, Beloshapkina OM, Gromakova AI. Technological aspects of obtaining microcapsules of plant origin substances. Problems of Biological, Medical and Pharmaceutical Chemistry. 2021;24(5):5–14 (In Russ.). https://doi.org/10.29296/25877313-2021-05-01Garg A, Chhipa K, Kumar L. Microencapsulation techniques in pharmaceutical formulation. Eur J Pharm Med Res. 2018;5(3):199–206.Garg A, Chhipa K, Kumar L. Microencapsulation techniques in pharmaceutical formulation. Eur J Pharm Med Res. 2018;5(3):199–206.Семкина ОА, Зверева ВИ, Джавахян МА, Хомик АС. Физико-химические и технологические характеристики зюзника европейского травы экстракта сухого и композиции на его основе. Химико-фармацевтический журнал. 2019;53(6):38–41. https://doi.org/10.30906/0023-1134-2019-53-6-38-41Semkina OA, Zvereva VI, Dzhavakhyan MA, Khomik AS. Studying the physicochemical and technological characteristics of dry extract from Lycopus europaeus L. herbs and related compositions. Pharmaceutical Chemistry Journal. 2019;53(6):550–2 https://doi.org/10.1007/s11094-019-02036-6Семкина ОА, Джавахян МА, Белошапкина ОМ, Борисенко ЕВ, Сидельников НИ. Способ инкапсуляции сухих растительных экстрактов. Патент Российской Федерации № 2782431; 2022.Semkina OA, Dzhavakhyan MA, Beloshapkina OM, Borisenko EV, Sidelnikov NI. Encapsulation method for dry plant extracts. Patent of the Russian Federation No. 2782431; 2022 (In Russ.). EDN: TBPPKX
The authors declare that there are no conflicts of interest present.