Якупов Илья Юрьевич
Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051
Ilya Yu. Yakupov
8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051
Кулешова Светлана Ивановна, канд. биол. наук
Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051
Svetlana I. Kuleshova, Сand. Sci. (Biol.)
8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051
Высочанская Ольга Николаевна
Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051
Olga N. Vysochanskaya
8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051
Симонова Елена Павловна
Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051
Elena P. Simonova
8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051
ВВЕДЕНИЕ. Лекарственные препараты на основе нафтифина широко используются в медицинской практике для лечения грибковых инфекций. Одним из основных показателей качества лекарственного препарата является содержание действующего вещества. При разработке методик количественного определения для рутинного анализа лекарственных средств особое внимание уделяется сокращению временных и материальных затрат.
ЦЕЛЬ. Модернизация методики количественного определения нафтифина и его примесей в лекарственных препаратах методом ВЭЖХ с использованием колонок малого объема, позволяющих сократить время анализа и расход реактивов.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Объектами исследования были субстанция и препараты нафтифина в форме 1% спиртового раствора и крема для наружного применения. Хроматографирование растворов проводили на жидкостных хроматографах Agilent 1200 Infinity и Agilent Infinity II 1290, оснащенных диодно-матричными детекторами с использованием нескольких хроматографических колонок: XBridge Phenyl 20×4,6 мм с размерами частиц 2,5 и 3,5 мкм и Acquity BEH Phenyl 75×2,1 мм, 1,7 мкм. Для оценки специфичности методики использовали образцы N-метил-1-нафталинметиламина, коричного альдегида и растворы нафтифина после химической, термической и фотолитической деструкции.
РЕЗУЛЬТАТЫ. Подобран оптимальный нетоксичный растворитель проб — 0,1% раствор ортофосфорной кислоты и доказано, что для разных лекарственных форм могут быть применены разные растворители. Выбраны условия анализа: концентрация испытуемых растворов нафтифина — 10 мкг/мл, колонка XBridge Phenyl (20×4,6 мм; 2,5 мкм), градиентный режим элюирования смесью 0,1% раствора хлорной кислоты и ацетонитрила со скоростью 1 мл/мин. Показано, что детектирование при длине волны 254 нм обеспечивает наилучшее соотношение сигнала и шума для пика нафтифина. Воспроизводимость разработанной методики количественного определения нафтифина была подтверждена валидацией согласно требованиям Государственной фармакопеи Российской Федерации. Специфичность методики подтверждена хроматографированием растворителя, подвижной фазы и модельных растворов, содержащих основные примеси нафтифина. Линейность методики подтверждена в диапазоне 80–120% нафтифина (коэффициент корреляции составил 0,995). При проверке правильности методики открываемость составила 100,2%. Доказана устойчивость методики при незначительных изменениях хроматографических параметров. Время удерживания пика нафтифина — около 2 мин.
ВЫВОДЫ. Разработана селективная и чувствительная ВЭЖХ-методика количественного определения нафтифина в лекарственных средствах, позволяющая сократить время анализа и свести к минимуму расход используемых реагентов. Результаты валидации методики удовлетворяют критериям приемлемости, подтверждают ее пригодность и воспроизводимость.
INTRODUCTION. Naftifine medicinal products are widely used in medical practice to treat fungal infections. A key quality attribute of a naftifine medicinal product is the content of the active substance. It is essential to develop quantitative analytical procedures for the routine control of medicines with a particular focus on reducing time and costs.
AIM. This study aimed to update the analytical procedures for the quantitative determination of naftifine and its impurities in medicines by high-performance liquid chromatography (HPLC) with small-volume columns providing a reduction in assay time and reagent consumption.
MATERIALS AND METHODS. This study focused on the active substance naftifine and naftifine-based medicinal products, including a 1% naftifine alcohol solution and a 1% naftifine cream for cutaneous use. The solutions were analysed on Agilent 1200 Infinity and Agilent Infinity II 1290 liquid chromatography systems equipped with diode-array detectors and several chromatographic columns: XBridge Phenyl, 20×4.6 mm, 2.5 μm; XBridge Phenyl, 20×4.6 mm, 3.5 μm; and Acquity BEH Phenyl, 75×2.1 mm, 1.7 μm. The specificity of the analytical procedure was evaluated using spiking solutions of N-methyl-1-naphthalenemethylamine and cinnamaldehyde as well as naftifine solutions after chemical, thermal, and photolytic decomposition.
RESULTS. The authors identified the optimal non-toxic solvent (0.1% orthophosphoric acid solution) and demonstrated the applicability of different solvents to different dosage forms. Additionally, the selected analytical conditions included the following: 10 μg/mL naftifine solutions were chromatographed on an XBridge Phenyl column (20×4.6 mm; 2.5 μm) using a gradient of 0.1% perchloric acid and acetonitrile at an elution rate of 1 mL/min. The study showed that the selected detection wavelength of 254 nm provided the best signal-to-noise ratio for the naftifine peak. The reproducibility of the developed quantitative determination procedure was confirmed by validation in accordance with the current requirements of the State Pharmacopoeia of the Russian Federation. The specificity of the analytical procedure was shown by chromatographic analysis of the solvent, mobile phase, and solutions containing the main naftifine impurities. The validation study confirmed the linearity of the analytical procedure in the range of 80–120% (with a correlation coefficient of 0.995). During the accuracy validation, the recovery rate was 100.2%. The validation study demonstrated the robustness of the analytical procedure to minor changes in the chromatographic parameters. The naftifine retention time amounted to approximately 2 minutes.
CONCLUSIONS. The authors developed a selective and sensitive HPLC-based analytical procedure for the quantitative determination of naftifine in medicines. This analytical procedure provides for a reduction in assay time and reagent consumption, and its compliance with the validation acceptance criteria indicates its suitability and reproducibility.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.