vedomostiregmedРегуляторные исследования и экспертиза лекарственных средствRegulatory Research and Medicine Evaluation3034-30623034-3453Federal State Budgetary Institution ‘Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products’ of the Ministry of Health of the Russian Federation (FSBI ‘SCEEMP’)10.30895/1991-2919-2023-458vedomostiregmed-458Research ArticleРАЗРАБОТКА И ВАЛИДАЦИЯ МЕТОДИК ИССЛЕДОВАНИЯDEVELOPMENT AND VALIDATION OF ANALYTICAL PROCEDURESОпределение аскорбиновой кислоты в лекарственных растительных препаратах методом ВЭЖХQuantitative Determination of Ascorbic Acid in Herbal Medicinal Products by HPLChttps://orcid.org/0000-0002-9917-9367ГоломазоваТ. А.GolomazovaT. A.

Голомазова Татьяна Александровна

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Tatyana A. Golomazova

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

golomazovata@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8389-4799ШеферЕ. П.SheferE. P.

Шефер Елена Павловна - кандидат фармацевтических наук.

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Elena P. Shefer - Сand. Sci. (Pharm.).

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

shefer@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-3278-1994ПрохватиловаС. С.ProkhvatilovaS. S.

Прохватилова Светлана Степановна - кандидат фармацевтических наук.

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Svetlana S. Prokhvatilova - Сand. Sci. (Pharm.).

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

prokhvatilova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-7818-5303АнтоноваН. П.AntonovaN. P.

Антонова Наталия Петровна - кандидат биологических наук.

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Natalia P. Antonova - Сand. Sci. (Biol.).

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

nantonava@expmed.ruФедеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияScientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal ProductsRussian Federation202326062023132184194Copyright © Голомазова Т.А., Шефер Е.П., Прохватилова С.С., Антонова Н.П., 20232023Голомазова Т.А., Шефер Е.П., Прохватилова С.С., Антонова Н.П.Golomazova T.A., Shefer E.P., Prokhvatilova S.S., Antonova N.P.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.vedomostincesmp.ru/jour/article/view/458

Аскорбиновая кислота (витамин С) участвует во многих биохимических процессах в организме человека, необходимых для его жизнедеятельности. Одним из природных источников витамина С являются плоды шиповника, которые применяются в виде отваров и являются компонентом многих витаминных сборов. Методы количественного определения аскорбиновой кислоты, включенные в фармакопейные статьи Государственной фармакопеи Российской Федерации, имеют ряд недостатков, что не позволяет объективно оценить содержание аскорбиновой кислоты в лекарственном растительном сырье (ЛРС) и лекарственных растительных препаратах (ЛРП).

Цель работы

Цель работы: разработка методики количественного определения аскорбиновой кислоты в ЛРС и ЛРП методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Материалы и методы

Материалы и методы. Объектами исследования служили лекарственные растительные препараты «Плоды шиповника» и «Витаминный сбор № 2», стандартные образцы аскорбиновой кислоты, рутозида, кверцетина, галловой кислоты, кофейной кислоты, хлорогеновой кислоты, лютеолин-7-глюкозида, лимонной кислоты, DL-яблочной кислоты, тиамина и пиридоксина гидрохлорида. Исследование проводили с использованием жидкостного хроматографа Agilent 1260 Infinity II с диодно-матричным детектором. Хроматографическая колонка GL Sciences Inc, Inertsil ODS-3 250 мм × 4,6 мм × 5 мкм, режим подачи подвижной фазы градиентный, аналитическая длина волны 244 нм.

Результаты

Результаты: аскорбиновая кислота может быть количественно определена в ЛРС и ЛРП методом ВЭЖХ. Надлежащие условия пробоподготовки и хроматографирования позволяют ингибировать процессы окисления аскорбиновой кислоты в водных растворах на время, достаточное для проведения полного испытания (не менее 8 ч).

Выводы

Выводы: разработана высокочувствительная и селективная методика количественного определения аскорбиновой кислоты методом ВЭЖХ для стандартизации ЛРС/ЛРП, которая может быть рекомендована для включения в ФС «Шиповника плоды» и «Витаминный сбор № 2». Норму содержания аскорбиновой кислоты («не менее 0,2%») в ЛРС/ЛРП «Шиповника плоды» и ЛРП «Витаминный сбор № 2», установленную с помощью титриметрического метода, не рекомендуется снижать при переходе на использование метода ВЭЖХ. Проблема заниженного содержания аскорбиновой кислоты в подавляющем количестве испытуемых образцов шиповника, возможно, связана с использованием низковитаминных видов шиповника секции Rosa caninae, которые должны применяться только как желчегонное средство.

Ascorbic acid (vitamin C) is involved in many vital biochemical processes in the human body. Rose hips are a natural source of ascorbic acid. Rose hips are used in decoctions and many vitamin herbal teas. Russian compendial methods for the quantitative determination of ascorbic acid have certain limitations precluding its objective measurement in herbal drugs, herbal drug preparations, and herbal medicinal products.

The aim of the study was to develop an analytical procedure for the quantitative determination of ascorbic acid in herbal drugs, herbal medicinal preparations, and herbal medicinal products using high performance liquid chromatography (HPLC).

Materials and methods

Materials and methods. The study involved two herbal medicinal products, Rose Hips (rose hips) and Vitamin Herbal Tea 2 (rose hips and rowan fruits), and reference standards for ascorbic acid, rutoside, quercetin, gallic acid, caffeic acid, chlorogenic acid, luteolin-7-glucoside, citric acid, DL-malic acid, thiamine, and pyridoxine hydrochloride. The authors used a 1260 Infinity II chromatograph with a diode array detector by Agilent and an Inertsil ODS-3 chromatographic column (250 mm × 4.6 mm, 5 µm) by GL Sciences. The HPLC system was operated in gradient elution mode, and the detector was set at 244 nm.

Results

Results. Ascorbic acid content in herbal drugs, herbal medicinal preparations, and herbal medicinal products can be determined by HPLC. Adequate sample preparation and chromatography conditions allow for inhibiting ascorbic acid oxidation in aqueous solutions for a period sufficient to complete testing (not less than 8 h).

Conclusions

Conclusions. The authors developed a highly sensitive and selective HPLC procedure for the quantitative determination of ascorbic acid intended for the standardisation of herbal drugs, herbal medicinal preparations, and herbal medicinal products. The procedure is worthy of inclusion in the Rose Hips and Vitamin Herbal Tea 2 monographs of the State Pharmacopoeia of the Russian Federation. Switching to HPLC should not require lowering the limit for ascorbic acid (not less than 0.2%) established in the Rose Hips and Vitamin Herbal Tea 2 monographs for the titration method. The ascorbic acid content was below this limit in the vast majority of study samples. However, this discrepancy may be explained by the presence of dog rose (Rosa canina) species low in vitamin C, which should normally be used only as choleretics.

шиповника плодыаскорбиновая кислотавитамин СВЭЖХвысокоэффективная жидкостная хроматографиявитаминный сборлекарственные растительные препаратыRose hipsdog rose fruitsRosae fructusascorbic acidvitamin CHPLChigh performance liquid chromatographyvitamin herbal teaherbal drugsherbal medicinal preparationsherbal medicinal productsРабота выполнена в рамках государственного задания ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России № 056-00052-23-00 на проведение прикладных научных исследований (номер государственного учета НИР 121021800098-4)The study reported in this publication was carried out as part of publicly funded research project No. 056-00052-23-00 and was supported by the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products (R&D public accounting No. 121021800098-4)ReferencesЛаман Н, Копылова Н. Шиповник — природный концентрат витаминов и антиоксидантов. Наука и инновации. 2017;10(176):45–9.Laman N, Kapylova N. Rosehips as a natural concentrate of vitamins and antioxidants. The Science and Innovations. 2017;10(176):45–9 (In Russ.). EDN: SNNROINovakova L, Solich P, Solichova D. HPLC methods for simultaneous determination of ascorbic and dehydroascorbic acids. Trends Anal Chem. 2008;27(10): 942–58. https://doi.org/10.1016/j.trac.2008.08.006Novakova L, Solich P, Solichova D. HPLC methods for simultaneous determination of ascorbic and dehydroascorbic acids. Trends Anal Chem. 2008;27(10): 942–58. https://doi.org/10.1016/j.trac.2008.08.006Um M, Kim JW, Lee JW. Optimization of ascorbic acid extraction from Rugosa Rose (Rosa rugosa Thunb.) fruit using response surface methodology and validation of the analytical method. J Korean Wood Sci Technol. 2020;48(3):364–75. https://doi.org/10.5658/WOOD.2020.48.3.364Um M, Kim JW, Lee JW. Optimization of ascorbic acid extraction from Rugosa Rose (Rosa rugosa Thunb.) fruit using response surface methodology and validation of the analytical method. J Korean Wood Sci Technol. 2020;48(3):364–75. https://doi.org/10.5658/WOOD.2020.48.3.364Хасанов ВВ, Дычко КА, Куряева ТТ, Нестерова ЕВ. Определение аскорбиновой кислоты в крови методом ВЭЖХ. Аналитика и контроль. 2013;17(3):322–5.Khasanov VV, Dychko KA, Kuriaeva TT, Nesterova EV. HPLC determination of ascorbic acid in blood. Analytics and Сontrol. 2013;17(3):322–5 (In Russ.). EDN: RBACBXРадждип С, Бхавана П, Храмченко ВЕ. Содержание аскорбиновой кислоты в зеленых, красных и черных листьях бадана толстолистного. Научное обозрение. Педагогические науки. 2019;(4):86–9.Rajdeep S, Bhavana P, Khramchenko VE. Ascorbic acid concentration in green, red, and black leaves of Bergenia crassifolia. Scientific Review. Pedagogical Sciences. 2019;(4):86–9 (In Russ.). EDN: JOQDXNМорозов СВ, Ткачева НИ, Ткачев АВ. Проблемы комплексного химического профилирования лекарственных растений. Химия растительного сырья. 2018;(4):5–28. https://doi.org/10.14258/jcprm.2018044003Morozov SV, Tkacheva NI, Tkachev AV. Problems of comprehensive chemical profiling of medicinal plants. Chemistry of Plant Raw Material. 2018;(4):5– 28 (In Russ.). https://doi.org/10.14258/jcprm.2018044003Новрузов АР. Содержание и динамика накопления аскорбиновой кислоты в плодах Rosa canina L. Химия растительного сырья. 2014;(3):221–6. https://doi.org/10.14258/jcprm.1403221Novruzov AR. Contents and dynamics of accumulation of the ascorbic acid in fruits of Rosa сanina L. Chemistry of Plant Raw Material. 2014;(3):221–6 (In Russ.). https://doi.org/10.14258/jcprm.1403221

The authors declare that there are no conflicts of interest present.