Моргунов Игорь Михайлович
Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051
Igor M. Morgunov
8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051
Антонова Наталия Петровна - кандидат биологических наук.
Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051
Natalia P. Antonova - Cand. Sci. (Biol.).
8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051
Шефер Елена Павловна - кандидат фармацевтических наук.
Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051
Elena P. Shefer - Cand. Sci. (Pharm.).
8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051
Прохватилова Светлана Степановна - кандидат фармацевтических наук.
Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051
Svetlana S. Prokhvatilova - Cand. Sci. (Pharm.).
8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051
Голомазова Татьяна Александровна
Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051
Tatiana A. Golomazova
8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051
Метод ацидиметрического титрования, применяющийся для количественного определения алкалоидов термопсиса экстракта сухого, имеет ряд недостатков, таких как недостаточная специфичность и субъективность в определении конечной точки титрования. В различных частях производящего растения алкалоиды содержатся в разных соотношениях: в траве термопсиса ланцетного преобладает термопсин, а в семенах — цитизин. Различие в фармакологическом действии цитизина и термопсина обусловливает важность идентификации и количественного определения отдельных алкалоидов в термопсиса экстракте сухом.
Цель работы: разработать и валидировать методику подтверждения подлинности и количественного определения суммы алкалоидов термопсиса экстракта сухого методом высокоэффективной тонкослойной хроматографии (ВЭТСХ) с денситометрической оценкой результата анализа.
Материалы и методы: объектами исследования служили образцы двух опытно-промышленных серий термопсиса экстракта сухого, стандартные образцы цитизина и термопсина. Хроматографическое разделение проводили с использованием пластинок для ВЭТСХ Silica Gel 60 F254 20×10 см (Merck), результаты оценивали на денситометре TLC Scanner 4 (CAMAG®) и обрабатывали с помощью программы winCATS.
Результаты: подлинность термопсиса экстракта сухого подтверждена методом спектроденситометрии после ВЭТСХ-разделения. Применение специфичного раствора для обработки хроматографических пластинок позволило идентифицировать три доминирующих алкалоида термопсиса (термопсин, цитизин и неидентифицированный алкалоид с Rf≈0,2), сумма которых составила около 80% от суммы алкалоидов экстракта, и четыре минорных алкалоида. Определено количественное содержание цитизина, термопсина и суммы алкалоидов в пересчете на термопсин.
Выводы: разработана и валидирована методика подтверждения подлинности и количественного определения суммы алкалоидов в термопсиса экстракте сухом, позволяющая сократить время выполнения испытания с 4–5 до 2–2,5 ч.
When used to quantify alkaloids in thermopsis dry extract, acidimetric titration has several limitations, including insufficient specificity of the method and arbitrary selection of a titration endpoint. Different parts of the Thermopsis lanceolata plant produce alkaloids in different proportions: the herb is rich in thermopsine, whereas the seeds are rich in cytisine. Since thermopsine and cytisine have different pharmacological effects, it is important to identify and quantify individual alkaloids in thermopsis dry extract.
The aim of the study was to develop and validate an analytical procedure for identifying and quantifying total alkaloids in thermopsis dry extract by high-performance thin-layer chromatography (HPTLC) with densitometric detection.
Materials and methods. The study included samples from two pilot-scale batches of thermopsis dry extract and reference standards for cytisine and thermopsine. The authors used Merck HPTLС Silica Gel 60 F254 20×10 cm plates for chromato-graphic separation and analysed the results with a CAMAG® TLC Scanner 4 densitometer and the winCATS software.
Results. The authors identified thermopsis dry extract using HPTLC separation followed by spectrodensitometry. The alkaloid-specific solution applied to chromatography plates helped to identify the three most abundant and four minor alkaloids of thermopsis. The most abundant alkaloids were thermopsine, cytisine, and an unidentified alkaloid with a retention factor of approximately 0.2. These three alkaloids accounted for almost 80% of the total alkaloid content of the dry extract. The authors quantified cytisine, thermopsine, and total alkaloids expressed as thermopsine.
Conclusions. The authors developed and validated an analytical procedure for identifying and quantifying total alkaloids in thermopsis dry extract. This procedure offers the possibility of reducing the analysis time from 4–5 hours to 2–2.5 hours.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.