vedomostiregmedРегуляторные исследования и экспертиза лекарственных средствRegulatory Research and Medicine Evaluation3034-30623034-3453Federal State Budgetary Institution ‘Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products’ of the Ministry of Health of the Russian Federation (FSBI ‘SCEEMP’)10.30895/1991-2919-2022-406vedomostiregmed-406Research ArticleМЕТОДИКИ ИССЛЕДОВАНИЯTESTING PROCEDURESОсобенности проведения биоаналитической части исследования эквивалентности биоаналогичного препарата надропарина кальцияConsiderations for the Bioanalytical Part of Equivalence Studies of Biosimilar Nadroparin Calciumhttps://orcid.org/0000-0001-9690-1935КосманВ. М.KosmanV. M.

Косман Вера Михайловна - кандидат фармацевтических наук.

Заводская ул., д. 3, к. 245, г.п. Кузьмоловский, Всеволожский р-н, Ленинградская обл., 188663

Vera M. Kosman - Cand. Sci. (Pharm.).

25 Novokhokhlovskaya St., Moscow 109052

kosman.vm@doclinika.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6292-8934КарлинаМ. В.KarlinaM. V.

Карлина Марина Валерьевна - кандидат биологических наук.

Заводская ул., д. 3, к. 245, г.п. Кузьмоловский, Всеволожский р-н, Ленинградская обл., 188663

Marina V. Karlina - Cand. Sci. (Biol.).

25 Novokhokhlovskaya St., Moscow 109052

karlina.mv@doclinika.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6866-5741ФаустоваН. М.FaustovaN. M.

Фаустова Наталья Михайловна - кандидат химических наук.

Заводская ул., д. 3, к. 245, г.п. Кузьмоловский, Всеволожский р-н, Ленинградская обл., 188663

Natalia M. Faustova - Cand. Sci. (Chem.).

25 Novokhokhlovskaya St., Moscow 109052

faustova.nm@doclinika.ruЕжоваЕ. А.EzhovaE. A.

Ежова Екатерина Александровна.

Новохохловская ул., д. 25, Москва, 109052

Ekaterina A. Ezhova.

3/245 Zavodskaya St., Kuzmolovsky urban-type settlement, Vsevolozhsky district, Leningrad region 188663

mez@endopharm.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1584-8739КотельниковаИ. Г.KotelnikovaI. G.

Котельникова Ирина Геннадьевна - кандидат фармацевтических наук.

Новохохловская ул., д. 25, Москва, 109052

Irina G. Kotelnikova - Cand. Sci. (Pharm.).

3/245 Zavodskaya St., Kuzmolovsky urban-type settlement, Vsevolozhsky district, Leningrad region 188663

mez@endopharm.ruhttps://orcid.org/0000-0002-2447-7888МакаровВ. Г.MakarovV. G.

Макаров Валерий Геннадьевич - доктор медицинских наук.

Заводская ул., д. 3, к. 245, г.п. Кузьмоловский, Всеволожский р-н, Ленинградская обл., 188663

Valery G. Makarov - Dr. Sci. (Med.).

25 Novokhokhlovskaya St., Moscow 109052

makarov.vg@doclinika.ruhttps://orcid.org/0000-0003-3176-6386МакароваМ. Н.MakarovaM. N.

Макарова Марина Николаевна - доктор медицинских наук.

Заводская ул., д. 3, к. 245, г.п. Кузьмоловский, Всеволожский р-н, Ленинградская обл., 188663

Marina N. Makarova - Dr. Sci. (Med.).

25 Novokhokhlovskaya St., Moscow 109052

makarova.mn@doclinika.ruАкционерное общество «Научно-производственное объединение «ДОМ ФАРМАЦИИ»РоссияResearch-and-manufacturing company “HOME OF PHARMACY”Russian FederationМосковский эндокринный заводРоссияMoscow Endocrine PlantRussian Federation20232303202313189103Copyright © Косман В.М., Карлина М.В., Фаустова Н.М., Ежова Е.А., Котельникова И.Г., Макаров В.Г., Макарова М.Н., 20232023Косман В.М., Карлина М.В., Фаустова Н.М., Ежова Е.А., Котельникова И.Г., Макаров В.Г., Макарова М.Н.Kosman V.M., Karlina M.V., Faustova N.M., Ezhova E.A., Kotelnikova I.G., Makarov V.G., Makarova M.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.vedomostincesmp.ru/jour/article/view/406

Для сравнительного изучения фармакодинамики и подтверждения эквивалентности препаратов низкомолекулярных гепаринов (НМГ) согласно современным регуляторным требованиям необходимо сопоставить три фармакодинамических показателя: анти-Ха и анти-IIа активности и концентрацию ингибитора пути тканевого фактора (TFPI). Цель работы — анализ особенностей проведения биоаналитической части исследования эквивалентности биоаналогичного препарата надропарина кальция при подкожном введении. Материалы и методы: определение анти-Ха и анти-IIа активности НМГ и содержания TFPI в образцах плазмы крови человека, полученных после однократного подкожного введения тестируемого и референтного препаратов в одной дозе, выполнено с применением коммерчески доступных наборов реагентов и предварительно валидированных методик. Основные фармакодинамические параметры (суррогатные фармакокинетические маркеры): максимальная активность или концентрация (Amax или Сmax), время достижения максимальной активности или концентрации (Тmax), площадь под кривой «активность (концентрация) — время» (AUC), период полувыведения (T1/2) рассчитаны внемодельным методом статистических моментов и  выполнена их дальнейшая статистическая обработка. Результаты: полученные результаты оценки анти-Ха активности и TFPI позволили рассчитать и сопоставить фармакодинамические параметры (Аmax или Cmax, AUC0-24, AUC0-∞, Тmax, T1/2), а также оценить доверительные интервалы, необходимые для подтверждения эквивалентности исследованных препаратов. Данные по значениям анти-IIа активности имели характер колебаний в пределах одного уровня, что не позволило рассчитать и сопоставить фармакодинамические параметры. Выводы: выявлены особенности, которые необходимо учитывать при планировании исследований фармакодинамики препаратов надропарина кальция: целесообразность разделения каждого образца при отборе с получением двух испытуемых аликвот (одна для определения анти-Ха и анти-IIа активностей, вторая — для анализа TFPI) для корректного выполнения аналитического этапа; достаточность подтверждения отсутствия мешающего  влияния  действующего  вещества  на   аналитическую   процедуру  при валидации  биоаналитических  методик  оценки  анти-Ха  активности,  анти-IIа активности и  содержания  TFPI  в  плазме  крови  человека,  валидированных в диапазоне концентраций 0,024–0,182 МЕ/мл, 0,0069–0,052 МЕ/мл и  1,56–100  нг/мл соответственно; возможность получения данных, не позволяющих рассчитать фармакодинамические параметры и сопоставить доверительные интервалы для всех трех фармакодинамических показателей.  Указанные  особенности  могут быть характерны для других препаратов НМГ.

According to current regulatory views, a comparative study of the pharmacodynamics (PD) of low molecular weight heparin (LMWH) products and confirmation of their equivalence require comparing three PD markers: the anti-Xa activity, the anti-IIa activity, and the tissue factor pathway inhibitor (TFPI) concentration. The aim of this study was to analyse the features specific to the bioanalytical part of an equivalence study of a nadroparin calcium biosimilar after single subcutaneous administration. Material and methods: the anti-Xa and anti-IIa activity values and TFPI content were determined in human plasma samples obtained after single subcutaneous administration of the test and the reference product in the same dose, using commercially available reagent kits and pre-validated assays. The authors calculated the main PD parameters (surrogate pharmacokinetic markers), namely the maximum activity or concentration (Amax or Cmax), time to maximum activity or concentration (Tmax), area under the activity–time (or concentration–time) curve (AUC ), and half-life period (T1/2), by means of model-independent statistical moment analysis and carried out further statistical testing of the parameters. Results: the anti-Xa activity and TFPI concentration results provided for  the  possibility  of  calculating  and  comparing  the PD parameters (Amax or Cmax, AUC0-24, AUC0-∞, Tmax, T1/2) and estimating the confidence intervals that are necessary to confirm the bioequivalence of the studied products. The anti-IIa activity data had a characteristic pattern of slight fluctuations around one level, which prevented the calculation and comparison of PD parameters. Conclusion: the study identified specific features to consider when planning comparative PD studies of nadroparin calcium products. Firstly, it is feasible to divide samples into two test aliquots (one for anti-Xa and anti-IIa activity determination, the other for TFPI analysis) at the moment of collection in order to perform the analytical step correctly. Secondly, there is no need in full validation for the bioanalytical assays of the anti-Xa and anti-II activity and TFPI content in human plasma validated in the concentration ranges of 0.024–0.182 IU/mL, 0.0069–0.052 IU/mL and 1.56–100 ng/mL, respectively; a confirmation that the active ingredient does not interfere with the analytical procedure is adequate for the purpose. Finally, the data obtained may not allow for calculating PD parameters and comparing confidence intervals for all three markers. The listed considerations may be relevant for other LMWH products as well.

сравнительная фармакодинамикабиоаналогичный препаратнадропарин кальцияоднократное подкожное введениепрепараты низкомолекулярных гепаринованти-Ха активностьанти-IIа активностьингибитор пути тканевого факторасуррогатные маркеры концентрацииcomparative pharmacodynamicsbiosimilar medicinal productnadroparin calciumsingle subcutaneous administrationlow molecular weight heparinsanti-Xa activityanti-IIa activitytissue factor pathway inhibitorsurrogate pharmacokinetic markersReferencesHoffmann U, Harenberg J, Bauer K, Huhle G, Tolle AR, Feuring M, Christ M. Bioequivalence of subcutaneous and intravenous body-weight-independent high-dose low-molecular-weight heparin Certoparin on anti-Xa, Heptest, and tissue factor pathway inhibitor activity in volunteer. Blood Coagul Fibrinolysis. 2002;13(4):289–96. https://doi.org/10.1097/00001721-200206000-00003Hoffmann U, Harenberg J, Bauer K, Huhle G, Tolle AR, Feuring M, Christ M. Bioequivalence of subcutaneous and intravenous body-weight-independent high-dose low-molecular-weight heparin Certoparin on anti-Xa, Heptest, and tissue factor pathway inhibitor activity in volunteer. Blood Coagul Fibrinolysis. 2002;13(4):289–96. https://doi.org/10.1097/00001721-200206000-00003Feng L, Shen-Tu J, Liu J, Chen J, Wu L, Huang M. Bioequivalence of generic and branded subcutaneous enoxaparin: A single-dose, randomized-sequence, open-label, two-period crossover study in healthy Chinese male subjects. Clin Ther. 2009;31(7):1559– 67. https://doi.org/10.1016/j.clinthera.2009.07.017Feng L, Shen-Tu J, Liu J, Chen J, Wu L, Huang M. Bioequivalence of generic and branded subcutaneous enoxaparin: A single-dose, randomized-sequence, open-label, two-period crossover study in healthy Chinese male subjects. Clin Ther. 2009;31(7):1559– 67. https://doi.org/10.1016/j.clinthera.2009.07.017Gadiko C, Thota S, Tippabotla SK. Pharmacokinetic parameters to be evaluated for selected low molecular weight heparins in bioequivalence studies. Int J Pharm Sci Res. 2012;3(11):4065–72. https://doi.org/10.13040/IJPSR.0975-8232.3(11).4065-72Gadiko C, Thota S, Tippabotla SK. Pharmacokinetic parameters to be evaluated for selected low molecular weight heparins in bioequivalence studies. Int J Pharm Sci Res. 2012;3(11):4065–72. https://doi.org/10.13040/IJPSR.0975-8232.3(11).4065-72Gadiko C, Tippabhotla SK, Thota S, Cheerla R, Betha MR, Vobalaboina V. Bioequivalence study of two subcutaneous formulations of dalteparin: randomized, single-dose, two-sequence, two-period, cross-over study in healthy volunteers. J Drug Assess. 2013;2(1):21–9. https://doi.org/10.3109/21556660.2013.781504Gadiko C, Tippabhotla SK, Thota S, Cheerla R, Betha MR, Vobalaboina V. Bioequivalence study of two subcutaneous formulations of dalteparin: randomized, single-dose, two-sequence, two-period, cross-over study in healthy volunteers. J Drug Assess. 2013;2(1):21–9. https://doi.org/10.3109/21556660.2013.781504Boubaker H, Grissa MH, Sassi M, Chakroun T, Beltaief K, Hassine M, et al. Generic and branded enoxaparin bioequivalence: A clinical and experimental study. J Bioequiv Availab. 2015;7(5):225–8. https://doi.org/10.4172/jbb.1000244Boubaker H, Grissa MH, Sassi M, Chakroun T, Beltaief K, Hassine M, et al. Generic and branded enoxaparin bioequivalence: A clinical and experimental study. J Bioequiv Availab. 2015;7(5):225–8. https://doi.org/10.4172/jbb.1000244Martinez González J, Monreal M, Ayani Almagia IA, Llaudo Garín J, Ochoa Diaz de Monasterioguren L, Gutierro Adúriz I. Bioequivalence of a biosimilar enoxaparin sodium to Clexane® after single 100 mg subcutaneous dose: results of a randomized, double-blind, crossover study in healthy volunteers. Drug Des Devel Ther. 2018;12:575–82. https://doi.org/10.2147/DDDT.S162817Martinez González J, Monreal M, Ayani Almagia IA, Llaudo Garín J, Ochoa Diaz de Monasterioguren L, Gutierro Adúriz I. Bioequivalence of a biosimilar enoxaparin sodium to Clexane® after single 100 mg subcutaneous dose: results of a randomized, double-blind, crossover study in healthy volunteers. Drug Des Devel Ther. 2018;12:575–82. https://doi.org/10.2147/DDDT.S162817Zhang Y, Huo M, Zhou J, Xie S. PKSolver: An add-in program for pharmacokinetic and pharmacodynamic data analysis in Microsoft Excel. Comput Methods Programs Biomed. 2010;99(3):306–14. https://doi.org/10.1016/j.cmpb.2010.01.007Zhang Y, Huo M, Zhou J, Xie S. PKSolver: An add-in program for pharmacokinetic and pharmacodynamic data analysis in Microsoft Excel. Comput Methods Programs Biomed. 2010;99(3):306–14. https://doi.org/10.1016/j.cmpb.2010.01.007Воробьев АВ, Чабров АМ, Савченко АА, Макацария АД Патогенетические особенности применения антикоагулянтной терапии у онкологических больных. Акушерство, гинекология и репродукция. 2016;10(1):26–37. https://doi.org/10.17749/2313-7347.2015.10.1.026-037Vorobiev AV, Chabrov AM, Savchenko AA, Makatsariya AD. Antithrombotic therapy in cancer patients. Akusherstvo, ginekologiya i reproduktsiya = Obstetrics, Gynecology and Reproduction. 2016;10(1):26–37 (In Russ.). https://doi.org/10.17749/2313-7347.2015.10.1.026-037Бицадзе ВО, Макацария АД. Применение низкомолекулярных гепаринов в акушерской практике. Российский медицинский журнал. 2000;8(18):772.Bitsadze VO, Makatsariya AD. The use of low molecular weight heparins in obstetric practice. Rossiyskiy meditsinskiy zhurnal = Russian Medical Journal. 2000;8(18):772 (In Russ.)Fan P, Gao Y, Zheng M, Xu T, Schoenhagen P, Jin Z. Recent progress and market analysis of anticoagulant drugs. J Thorac Dis. 2018;10(3):2011–25. https://doi.org/10.21037/jtd.2018.03.95Fan P, Gao Y, Zheng M, Xu T, Schoenhagen P, Jin Z. Recent progress and market analysis of anticoagulant drugs. J Thorac Dis. 2018;10(3):2011–25. https://doi.org/10.21037/jtd.2018.03.95Qiu M, Huang S, Luo C, Wu Z, Liang B, Huang H, et al. Pharmacological and clinical application of heparin progress: An essential drug for modern medicine. Biomed Pharmacother. 2021;139:111561. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2021.111561Qiu M, Huang S, Luo C, Wu Z, Liang B, Huang H, et al. Pharmacological and clinical application of heparin progress: An essential drug for modern medicine. Biomed Pharmacother. 2021;139:111561. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2021.111561Стуров НВ. Клиническая фармакология НМГ: важнейшие аспекты. Трудный пациент. 2006;4(11):38–42. [Sturov NN. Clinical pharmacology of low molecular weight heparins: the most important aspects. Trudny patsient = Difficult Patient. 2006;4(11):38–42 (In Russ.)]Sturov NN. Clinical pharmacology of low molecular weight heparins: the most important aspects. Trudny patsient = Difficult Patient. 2006;4(11):38–42 (In Russ.)Низкомолекулярные гепарины: оригинальные препараты и их биоаналоги — выбор в клинической практике. Семинар. Атеротромбоз. 2017;(2):142–51.Low molecular weight heparins: original drugs and their biosimilars — the choice in clinical practice. Seminar. Aterotromboz = Atherothrombosis. 2017;(2):142–51 (In Russ.)Fareed J, Hoppensteadt D, Walenga J, Iqbal O, Ma Q, Jeske W, Sheikh T. Pharmacodynamic and pharmacokinetic properties of enoxaparin: implications for clinical practice. Clin Pharmacokinet. 2003;42(12):1043–57. https: //doi.org/10.2165/00003088-200342120-00003Fareed J, Hoppensteadt D, Walenga J, Iqbal O, Ma Q, Jeske W, Sheikh T. Pharmacodynamic and pharmacokinetic properties of enoxaparin: implications for clinical practice. Clin Pharmacokinet. 2003;42(12):1043–57. https: //doi.org/10.2165/00003088-200342120-00003Дмитриев ВВ, Липай НВ, Мигаль НВ, Бегун ИВ, Дмитриев ЕВ. Фармакокинетика низкомолекулярных гепаринов при тромбозах, осложнивших лечение детей с онкологическими заболеваниями. Онкогематология. 2021;16(1):73–82. https://doi.org/10.17650/1818-8346-2021-16-1-73-82Dmitriev VV, Lipay NV, Migal NV, Begun IV, Dmitriev EV. Pharmacokinetics of low molecular weight heparins in thrombosis, complicate the treatment of children with cancer. Onkogematologiya = Oncohematology. 2021;16(1):73–82 (In Russ.) https://doi.org/10.17650/1818-8346-2021-16-1-73-82Rico S, Antonijoan RM, Ballester MR, Gutierro I, Ayani I, Martinez-Gonzalez J, et al. Pharmacodynamics assessment of Bemiparin after multiple prophylactic and single therapeutic doses in adult and elderly healthy volunteers and in subjects with varying degrees of renal impairment. Thromb Res. 2014;133(6):1029–38. https://doi.org/10.1016/j.thromres.2014.03.038Rico S, Antonijoan RM, Ballester MR, Gutierro I, Ayani I, Martinez-Gonzalez J, et al. Pharmacodynamics assessment of Bemiparin after multiple prophylactic and single therapeutic doses in adult and elderly healthy volunteers and in subjects with varying degrees of renal impairment. Thromb Res. 2014;133(6):1029–38. https://doi.org/10.1016/j.thromres.2014.03.038Egan G, Ensom MH. Measuring anti-factor Хa activity to monitor low-molecular-weight heparin in obesity: a critical review. Can J Hosp Pharm. 2015;68(1):33–47. https://doi.org/10.4212/cjhp.v68i1.1423Egan G, Ensom MH. Measuring anti-factor Хa activity to monitor low-molecular-weight heparin in obesity: a critical review. Can J Hosp Pharm. 2015;68(1):33–47. https://doi.org/10.4212/cjhp.v68i1.1423Nutescu EA, Burnett A, Fanikos J, Spinler S, Wittkowsky A. Pharmacology of anticoagulants used in the treatment of venous thromboembolism. J Thromb Thrombolysis. 2016;41(1):15–31. https://doi.org/10.1007/s11239-015-1314-3Nutescu EA, Burnett A, Fanikos J, Spinler S, Wittkowsky A. Pharmacology of anticoagulants used in the treatment of venous thromboembolism. J Thromb Thrombolysis. 2016;41(1):15–31. https://doi.org/10.1007/s11239-015-1314-3Pannucci CJ, Fleming KI, Bertolaccini CB, Prazak AM, Huang LC, Pickron TB. Assessment of anti-factor Xa levels of patients undergoing colorectal surgery given once-daily enoxaparin prophylaxis: a clinical study examining enoxaparin pharmacokinetics. JAMA Surg. 2019;154(8):697–704. https://doi.org/10.1001/jamasurg.2019.1165Pannucci CJ, Fleming KI, Bertolaccini CB, Prazak AM, Huang LC, Pickron TB. Assessment of anti-factor Xa levels of patients undergoing colorectal surgery given once-daily enoxaparin prophylaxis: a clinical study examining enoxaparin pharmacokinetics. JAMA Surg. 2019;154(8):697–704. https://doi.org/10.1001/jamasurg.2019.1165Cihlar R, Sramek V, Papiez A, Penka M, Suk P. Pharmacokinetic comparison of subcutaneous and intravenous nadroparin administration for thromboprophylaxis in critically ill patients on vasopressors. Pharmacology. 2020;105(1–2):73–8. https://doi.org/10.1159/000502847Cihlar R, Sramek V, Papiez A, Penka M, Suk P. Pharmacokinetic comparison of subcutaneous and intravenous nadroparin administration for thromboprophylaxis in critically ill patients on vasopressors. Pharmacology. 2020;105(1–2):73–8. https://doi.org/10.1159/000502847

The authors declare that there are no conflicts of interest present.