vedomostiregmedРегуляторные исследования и экспертиза лекарственных средствRegulatory Research and Medicine Evaluation3034-30623034-3453Federal State Budgetary Institution ‘Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products’ of the Ministry of Health of the Russian Federation (FSBI ‘SCEEMP’)10.30895/1991-2919-2021-11-4-246-254vedomostiregmed-368Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESОпределение ванкомицина В и родственных примесей ванкомицина с использованием жидкостной хроматографииDetermination of Vancomycin B and Vancomycin Impurities by Liquid Chromatographyhttps://orcid.org/0000-0002-9103-9239КулешоваС. И.KuleshovaS. I.

Кулешова Светлана Ивановна, кандидат биологических наук

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Svetlana I. Kuleshova, Cand. Sci. (Biol.)

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

Kuleshova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-2221-5534СимоноваЕ. П.SimonovaE. P.

Симонова Елена Павловна

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Elena P. Simonova

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

SimonovaE@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0003-4327-6640ВысочанскаяО. Н.VysochanskayaO. N.

Высочанская Ольга Николаевна

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Olga N. Vysochanskaya

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

visochanskayaon@expmed.ruФедеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияScientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal ProductsRussian Federation202101112021114246254Copyright © Кулешова С.И., Симонова Е.П., Высочанская О.Н., 20212021Кулешова С.И., Симонова Е.П., Высочанская О.Н.Kuleshova S.I., Simonova E.P., Vysochanskaya O.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.vedomostincesmp.ru/jour/article/view/368

При оценке качества лекарственных средств по содержанию родственных примесей предпочтительным является использование методов высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с применением мелкодисперсного сорбента и ультраэффективной жидкостной хроматографии (УЭЖХ), которые позволяют повысить эффективность хроматографического разделения действующих веществ и их родственных примесей, уменьшить временные затраты, оптимизировать использование материальных ресурсов. Цель работы: разработка методик определения основного компонента ванкомицина и его родственных примесей с применением ВЭЖХ и УЭЖХ для оптимизации проведения испытаний с оценкой разделительной способности хроматографической системы и ее эффективности. Материалы и методы: в качестве объекта исследований использовали препарат ванкомицина гидрохлорида в форме лиофилизата для приготовления раствора для инъекций и приема внутрь и стандартный образец ванкомицина гидрохлорида квалификации USP RS. Испытания проводили на жидкостном хроматографе Agilent 1290 Infinity с использованием хроматографических колонок Chromolith® Performance RP-18e, Kinetex С18, Nucleodur С18 Isis, Zorbax RRHD Eclipse Plus C18 и LiChrospher® RP-18. Результаты: при проведении анализа методом ВЭЖХ с использованием колонки Chromolith® (100×4,6 мм) время анализа сокращается на 10 мин по сравнению с методикой, описанной в Фармакопее США, и на 15 мин по сравнению с методикой, описанной в Британской фармакопее. Предлагаемая методика требует меньшего расхода элюента при возрастании эффективности хроматографического разделения. Применение УЭЖХ с использованием колонки Kinetex С18 (50×4,6 мм, 2,6 мкм) позволило сократить время анализа в 3 раза по сравнению с методикой, описанной в Британской фармакопее и использовать изократическое элюирование, что значительно упростило анализ. Время анализа в предлагаемых условиях хроматографирования составило 10 мин. Выводы: выбраны условия проведения испытания для методик ВЭЖХ и УЭЖХ, которые позволили значительно уменьшить время анализа, свести к минимуму расход дорогостоящих реагентов, увеличить эффективность хроматографического разделения при определении родственных примесей ванкомицина и его основного компонента – ванкомицина В.

The preferred test methods for control of product-related impurities in medicinal products are high-performance liquid chromatography (HPLC) with a fine sorbent, and ultra-performance liquid chromatography (UPLC), which allow for better chromatographic separation of active substances and related impurities, reduction of time costs, and saving of material resources. The aim of the study was to develop HPLC and UPLC test procedures and assess the chromatographic separation capacity and efficiency in order to improve determination of the main vancomycin component and related impurities. Materials and methods: vancomycin hydrochloride lyophilisate for oral solution and solution for injection, and vancomycin hydrochloride reference standard (USP RS) were used as test objects. Agilent 1290 Infinity liquid chromatography system, and Chromolith® Performance RP-18e, Kinetex C18, Nucleodur C18 Isis, Zorbax RRHD Eclipse Plus C18, and LiChrospher® RP-18 columns were used for the testing. Results: HPLC analysis using a Chromolith® column (100×4.6 mm) reduces the testing time by 10 minutes compared to the USP test procedure, and by 15 minutes compared to the British Pharmacopoeia procedure. The proposed test procedure requires less eluent and increases chromatographic separation efficiency. UPLC analysis using a Kinetex C18 column (50×4.6 mm, 2.6 μm) made it possible to reduce the testing time by two thirds compared to the British Pharmacopoeia procedure. The use of isocratic elution greatly simplified the testing. The testing time under the proposed chromatographic conditions was 10 minutes. Conclusions: the selected HPLC and UPLC test conditions made it possible to significantly reduce the time of testing, minimise the use of expensive reagents, and increase efficiency of chromatographic separation in the determination of vancomycin impurities and the main component Vancomycin B.

высокоэффективная жидкостная хроматографияультраэффективная жидкостная хроматографияванкомицина гидрохлоридванкомицин Вродственные примесиhigh-performance liquid chromatographyultra-performance liquid chromatographyvancomycin hydrochloridevancomycin Bproduct-related impuritiesРабота выполнена в рамках государственного задания ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России № 056-00005-21-00 на проведение прикладных научных исследований (номер государственного учета НИР 121021800098-4).The study reported in this publication was carried out as part of a publicly funded research project No. 056-00005-21-00 and was supported by the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products (R&D public accounting No. 121021800098-4).ReferencesJavorska L, Kujovska Krcmova L, Solichova D, Solich P, Kaska M. Modern methods for vancomycin determination in biological fluids by methods based on high-performance liquid chromatography. J Sep Sci. 2016;39(1):6–20. https://doi.org/10.1002/jssc.201500600Javorska L, Kujovska Krcmova L, Solichova D, Solich P, Kaska M. Modern methods for vancomycin determination in biological fluids by methods based on high-performance liquid chromatography. J Sep Sci. 2016;39(1):6–20. https://doi.org/10.1002/jssc.201500600Голубицкий ГБ, Куликов АЛ. UPLC vs. HPLC: Реальное ускорение. В кн.: Аналитическая хроматография и капиллярный электрофорез. Материалы Всероссийской конференции. Краснодар; 2013. С. 24. [Golubitsky GB, Kulikov AL. UPLC vs. HPLC: real acceleration. In: Analytical Chromatography and Capillary Electrophoresis. Materials of the All-Russian conference. Krasnodar; 2013. P. 24 (In Russ.)]Голубицкий ГБ, Куликов АЛ. UPLC vs. HPLC: Реальное ускорение. В кн.: Аналитическая хроматография и капиллярный электрофорез. Материалы Всероссийской конференции. Краснодар; 2013. С. 24. [Golubitsky GB, Kulikov AL. UPLC vs. HPLC: real acceleration. In: Analytical Chromatography and Capillary Electrophoresis. Materials of the All-Russian conference. Krasnodar; 2013. P. 24 (In Russ.)]Magreault S, Leroux S, Touati J, Storme T, Jacqz-Aigrain E. UPLC/MS/MS assay for the simultaneous determination of seven antibiotics in human serum – application to pediatric studies. J Pharm Biomed Anal. 2019;174:256–62. https://doi.org/10.1016/j.jpba.2019.03.004Magreault S, Leroux S, Touati J, Storme T, Jacqz-Aigrain E. UPLC/MS/MS assay for the simultaneous determination of seven antibiotics in human serum – application to pediatric studies. J Pharm Biomed Anal. 2019;174:256–62. https://doi.org/10.1016/j.jpba.2019.03.004Levine DP. Vancomycin: a history. Clin Infect Dis. 2006;42(Suppl 1):S5–12. https://doi.org/10.1086/491709Levine DP. Vancomycin: a history. Clin Infect Dis. 2006;42(Suppl 1):S5–12. https://doi.org/10.1086/491709Archer GL. Antimicrobial susceptibility and selection ore resistance among Staphylococcus epidermidis isolates from patients with infections of indwelling foreign devices. Antimicrob Agents Chemother. 1978;14(3):353–9. https://doi.org/10.1128/AAC.14.3.353Archer GL. Antimicrobial susceptibility and selection ore resistance among Staphylococcus epidermidis isolates from patients with infections of indwelling foreign devices. Antimicrob Agents Chemother. 1978;14(3):353–9. https://doi.org/10.1128/AAC.14.3.353Блатун ЛА, Крутиков МГ, Гришина ИА, Бобровников АЕ, Алексеев АА, Светухин АМ, Яковлев ВП. Клинико-лабораторная оценка эффективности ванкомицина (эдицин) при лечении гнойных ран кожи и мягких тканей, ожоговых ран и инфекционных осложнений ожоговой болезни. Антибиотики и химиотерапия. 2000;45(2):22–7. [Blatun LA, Krutikov MG, Grishina IA, Bobrovnikov AE, Alekseev AA, Svetukhin AM, Yakovlev VP. Clinical and laboratory evaluation of vancomycin (Edicin®) efficacy in the treatment of purulent wounds of the skin and soft tissues, burn wounds and infectious complications of burn disease. Antibiotiki i khimioterapiya = Antibiotics and Chemotherapy. 2000;45(2):22–7 (In Russ.)]Блатун ЛА, Крутиков МГ, Гришина ИА, Бобровников АЕ, Алексеев АА, Светухин АМ, Яковлев ВП. Клинико-лабораторная оценка эффективности ванкомицина (эдицин) при лечении гнойных ран кожи и мягких тканей, ожоговых ран и инфекционных осложнений ожоговой болезни. Антибиотики и химиотерапия. 2000;45(2):22–7. [Blatun LA, Krutikov MG, Grishina IA, Bobrovnikov AE, Alekseev AA, Svetukhin AM, Yakovlev VP. Clinical and laboratory evaluation of vancomycin (Edicin®) efficacy in the treatment of purulent wounds of the skin and soft tissues, burn wounds and infectious complications of burn disease. Antibiotiki i khimioterapiya = Antibiotics and Chemotherapy. 2000;45(2):22–7 (In Russ.)]Cao Yu, Yu J, Chen Yu, Zhang J, Wu X, Zhang Y, Li G. Development and validation of a new ultra-performance liquid chromatographic method for vancomycin assay in serum and its application to therapeutic drug monitoring. Ther Drug Monit. 2014;36(2):175–81. https://doi.org/10.1097/FTD.0b013e3182a458bcCao Yu, Yu J, Chen Yu, Zhang J, Wu X, Zhang Y, Li G. Development and validation of a new ultra-performance liquid chromatographic method for vancomycin assay in serum and its application to therapeutic drug monitoring. Ther Drug Monit. 2014;36(2):175–81. https://doi.org/10.1097/FTD.0b013e3182a458bcNirmala K, Ramesh Raju R. Determination of vancomycin by using RP-HPLC method in pharmaceutical preparations. Int J Res Ayurveda Pharm. 2013;4(1):116–9. https://doi.org/10.7897/2277-4343.04139Nirmala K, Ramesh Raju R. Determination of vancomycin by using RP-HPLC method in pharmaceutical preparations. Int J Res Ayurveda Pharm. 2013;4(1):116–9. https://doi.org/10.7897/2277-4343.04139

The authors declare that there are no conflicts of interest present.