vedomostiregmedРегуляторные исследования и экспертиза лекарственных средствRegulatory Research and Medicine Evaluation3034-30623034-3453Federal State Budgetary Institution ‘Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products’ of the Ministry of Health of the Russian Federation (FSBI ‘SCEEMP’)10.30895/1991-2919-2021-11-1-24-35vedomostiregmed-349Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESИспользование биомаркеров в фармакокинетических исследованиях лекарственных препаратов природного происхожденияUse of Biomarkers in Pharmacokinetics Studies of Medicinal Products of Natural Originhttps://orcid.org/0000-0001-9690-1935КосманВ. М.KosmanV. M.

Косман Вера Михайловна, кандидат фармацевтических наук

Заводская ул., 3, к. 245, г.п. Кузьмоловский, Всеволожский р-н, Ленинградская обл., 188663

Vera M. Kosman, Cand. Sci. (Pharm.)

3/245 Zavodskaya St., Kuzmolovsky urban-type settlement, Vsevolozhsky district, Leningrad region 188663

kosman.vm@doclinika.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6866-5741ФаустоваН. М.FaustovaN. M.

Фаустова Наталья Михайловна,  кандидат химических наук

Заводская ул., 3, к. 245, г.п. Кузьмоловский, Всеволожский р-н, Ленинградская обл., 188663

Natalia M. Faustova, Cand. Sci. (Chem)

3/245 Zavodskaya St., Kuzmolovsky urban-type settlement, Vsevolozhsky district, Leningrad region 188663

faustova.nm@doclinika.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6292-8934КарлинаМ. В.KarlinaM. V.

Карлина Марина Валерьевна, кандидат биологических наук

Заводская ул., 3, к. 245, г.п. Кузьмоловский, Всеволожский р-н, Ленинградская обл., 188663

Marina V. Karlina, Cand. Sci. (Biol.)

3/245 Zavodskaya St., Kuzmolovsky urban-type settlement, Vsevolozhsky district, Leningrad region 188663

karlina.mv@doclinika.ruhttps://orcid.org/0000-0002-2447-7888МакаровВ. Г.MakarovV. G.

Макаров Валерий Геннадиевич, доктор медицинских наук

Заводская ул., 3, к. 245, г.п. Кузьмоловский, Всеволожский р-н, Ленинградская обл., 188663

Valery G. Makarov, Dr. Sci (Med.) 

3/245 Zavodskaya St., Kuzmolovsky urban-type settlement, Vsevolozhsky district, Leningrad region 188663

makarov.vg@doclinika.ruhttps://orcid.org/0000-0003-3176-6386МакароваМ. Н.MakarovaM. N.

Макарова Марина Николаевна, доктор медицинских наук

Заводская ул., 3, к. 245, г.п. Кузьмоловский, Всеволожский р-н, Ленинградская обл., 188663

Marina N. Makarova, Dr. Sci (Med.) 

3/245 Zavodskaya St., Kuzmolovsky urban-type settlement, Vsevolozhsky district, Leningrad region 188663

makarova.mn@doclinika.ruЗакрытое акционерное общество «Санкт-Петербургский институт фармации»РоссияSt.-Petersburg Institute of PharmacyRussian Federation2021150120211112435Copyright © Косман В.М., Фаустова Н.М., Карлина М.В., Макаров В.Г., Макарова М.Н., 20212021Косман В.М., Фаустова Н.М., Карлина М.В., Макаров В.Г., Макарова М.Н.Kosman V.M., Faustova N.M., Karlina M.V., Makarov V.G., Makarova M.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.vedomostincesmp.ru/jour/article/view/349Резюме

Резюме. Лекарственные препараты природного происхождения имеют широкое применение благодаря их фармакологической активности и относительной безопасности. Химический состав таких препаратов, как правило, сложен – они могут являться гетерополимерами или смесями, содержащими пептиды, полисахариды и другие эндогенные компоненты и/или соединения, быстро метаболизируемые в живом организме. Традиционные подходы к изучению таких препаратов, основанные на хроматографических методах, зачастую оказываются неприменимы. Для изучения фармакокинетики препаратов природного происхождения возможно применение методов, основанных на оценке биологического действия и фармакодинамических свойствах таких препаратов, связанных с определением уровней биологических маркеров (биомаркеров).

Цель работы – обобщение накопленного экспериментального опыта по применению биомаркеров для оценки фармакокинетики на примере нескольких препаратов природного происхождения.

Материалы и методы

Материалы и методы: объектами исследования служили фукоидан, выделенный из Fucus vesiculosus, комплекс биологически активных веществ и гликозилированный полипептид, выделенные из гонад зеленых морских ежей Strongylocentrotus droebachiensis. Корреляции между концентрациями исследуемых смесей и активностью/концентрацией потенциальных биомаркеров были установлены на базе in vitro / ex vivo экспериментов. Для установления специфичности, калибровочного (линейного) диапазона отклика биомаркера, его нативного уровня были получены экспериментальные данные по его содержанию в плазме или сыворотке (in vitro)  и цельной крови (ex vivo) до и после внесения добавок известных количеств исследуемых препаратов. Аналитические методики были основаны на применении хромогенного (оптического) метода определения активности анти-Ха фактора, определении активности ферментов дипептидилпептидазы IV типа и лактатдегидрогеназы кинетическим методом со спектрофотометрическим детектированием продуктов ферментативных реакций.

Результаты

Результаты: анализ результатов исследований  ряда лекарственных препаратов природного происхождения (фукоидана, выделенного из Fucus vesiculosus; гликозилированного полипептида и комплекса биологически активных веществ, выделенных из внутренних органов S. droebachiensis) показал, что подход к изучению фармакокинетики подобных препаратов с использованием биомаркеров оправдан. Его применение позволило корректно рассчитать фармакокинетические параметры.

Выводы

Выводы: обсуждаемый подход может быть использован в различных биологических моделях и эффективен для исследования соединений, которые трудно или невозможно детектировать методами, традиционно используемыми для анализа биопроб при исследованиях фармакокинетики и биоэквивалентности препаратов. 

Abstract

Abstract. Medicinal products of natural origin are widely used by virtue of their pharmacological efficacy and relative safety. Chemical composition of such medicines is usually complex, they may be represented by heteropolymers or mixtures containing peptides, polysaccharides, and other compounds which are endogenous and/or rapidly metabolised in a living organism. Conventional, chromatography-based approaches to evaluation of such medicines are often not applicable. Pharmacokinetics of medicinal products of natural origin may be studied by methods based on assessment of biological action and pharmacodynamic properties of such medicines, which involves determination of biological marker (biomarker) levels.

The aim of the study was to summarise the accumulated experimental data on the use of biomarkers in pharmacokinetics studies as illustrated by a few medicinal products of natural origin.

Material and methods

Material and methods. The authors studied fucoidan from Fucus vesiculosus, as well as a complex of bioactive compounds and a glycopeptide—both isolated from gonads of green sea urchins (Strongylocentrotus droebachiensis). In vitro/ex vivo experiments were used to establish correlation between the concentrations of the test mixtures and the activity/concentration of potential biomarkers. Experiments showing the biomarker concentration in plasma or serum (in vitro) and whole blood (ex vivo) before and after spiking with the studied products were performed in order to assess specificity, calibration (linear) range of the biomarker response, and its native concentration. The analytical procedures were based on the chromogenic (optical) anti-factor Xa activity (AXA) assay, and determination of dipeptidyl peptidase 4 and lactate dehydrogenase activity by kinetic analysis with spectrophotometric detection of enzymatic reaction products.

Results

Results. The analysis of the results of studies of a number of natural products (fucoidan from Fucus vesiculosus; a complex of bioactive compounds isolated from gonads of green sea urchins S. droebachiensis; a glycopeptide isolated from internal organs of S. droebachiensis) demonstrated the feasibility of using biomarkers in pharmacokinetics studies of such products. This approach allowed for accurate calculation of pharmacokinetic parameters.

Conclusion

Conclusion. The discussed approach may be used for various biological models and is an effective means of studying compounds that are difficult or impossible to detect by conventional bioassays in pharmacokinetics and bioequivalence studies.

фармакокинетикапрепараты природного происхождениябиологическая активностьбиомаркерыанти- Ха фактордипептидилпептидаза IV типалактатдегидрогеназаэнзиматический анализкинетические методыфукоиданFucus vesiculosusбиологически активные веществагликозилированный полипептидStrongylocentrotus droebachiensispharmacokineticsmedicinal products of natural originbiological activitybiomarkersanti-factor Xadipeptidyl peptidase 4lactate dehydrogenaseenzymatic assaykinetic methodsfucoidanFucus vesiculosusbiologically active compoundsglycosylated polypeptideStrongylocentrotus droebachiensisРабота выполнена как инициативное исследование без финансовой поддержки.The study was performed as unsolicited independent research without financial support.ReferencesEvens R., ed. Drug and biological development: From molecule to product and beyond. New York: Springer; 2007.Evens R., ed. Drug and biological development: From molecule to product and beyond. New York: Springer; 2007.Hoffmann U, Harenberg J, Bauer K, Huhle G, Tolle AR, Feuring M, Christ M. Bioequivalence of subcutaneous and intravenous body-weight-independent high-dose low-molecular-weight heparin Certoparin on anti-Xa, Heptest, and tissue factor pathway inhibitor activity in volunteer. Blood Coagul Fibrinolysis. 2002;13(4):289–96. https://doi.org/10.1097/00001721-200206000-00003Hoffmann U, Harenberg J, Bauer K, Huhle G, Tolle AR, Feuring M, Christ M. Bioequivalence of subcutaneous and intravenous body-weight-independent high-dose low-molecular-weight heparin Certoparin on anti-Xa, Heptest, and tissue factor pathway inhibitor activity in volunteer. Blood Coagul Fibrinolysis. 2002;13(4):289–96. https://doi.org/10.1097/00001721-200206000-00003Feng L, Shen-Tu J, Liu J, Chen J, Wu L, Huang M. Bioequivalence of generic and branded subcutaneous enoxaparin: A single-dose, randomized-sequence, open-label, two-period crossover study in healthy Chinese male subjects. Clin Ther. 2009;31(7):1559–67. https://doi.org/10.1016/j.clinthera.2009.07.017Feng L, Shen-Tu J, Liu J, Chen J, Wu L, Huang M. Bioequivalence of generic and branded subcutaneous enoxaparin: A single-dose, randomized-sequence, open-label, two-period crossover study in healthy Chinese male subjects. Clin Ther. 2009;31(7):1559–67. https://doi.org/10.1016/j.clinthera.2009.07.017Gadiko C, Thota S, Tippabotla SK. Pharmacokinetic parameters to be evaluated for selected low molecular weight heparins in bioequivalence studies. Int J Pharm Sci Res. 2012;3(11):4065–72. https://doi.org/10.13040/IJPSR.0975-8232.3(11).4065-72Gadiko C, Thota S, Tippabotla SK. Pharmacokinetic parameters to be evaluated for selected low molecular weight heparins in bioequivalence studies. Int J Pharm Sci Res. 2012;3(11):4065–72. https://doi.org/10.13040/IJPSR.0975-8232.3(11).4065-72Gadiko C, Tippabhotla SK, Thota S, Cheerla R, Betha MR, Vobalaboina V. Bioequivalence study of two subcutaneous formulations of dalteparin: randomized, single-dose, two-sequence, two-period, cross-over study in healthy volunteers. J Drug Assess. 2013;2(1):21–9. https://doi.org/10.3109/21556660.2013.781504Gadiko C, Tippabhotla SK, Thota S, Cheerla R, Betha MR, Vobalaboina V. Bioequivalence study of two subcutaneous formulations of dalteparin: randomized, single-dose, two-sequence, two-period, cross-over study in healthy volunteers. J Drug Assess. 2013;2(1):21–9. https://doi.org/10.3109/21556660.2013.781504Boubaker H, Grissa MH, Sassi M, Chakroun T, Beltaief K, Hassine M, et al. Generic and branded enoxaparin bioequivalence: A clinical and experimental study. J Bioequiv Availab. 2015;7(5):225–8. https://doi.org/10.4172/jbb.1000244Boubaker H, Grissa MH, Sassi M, Chakroun T, Beltaief K, Hassine M, et al. Generic and branded enoxaparin bioequivalence: A clinical and experimental study. J Bioequiv Availab. 2015;7(5):225–8. https://doi.org/10.4172/jbb.1000244Martinez González J, Monreal M, Ayani Almagia IA, Llaudo Garín J, Ochoa Diaz de Monasterioguren L, Gutierro Adúriz I. Bioequivalence of a biosimilar enoxaparin sodium to Clexane® after single 100 mg subcutaneous dose: results of a randomized, double-blind, crossover study in healthy volunteers. Drug Des Devel Ther. 2018;12:575–82. https://doi.org/10.2147/DDDT.S162817Martinez González J, Monreal M, Ayani Almagia IA, Llaudo Garín J, Ochoa Diaz de Monasterioguren L, Gutierro Adúriz I. Bioequivalence of a biosimilar enoxaparin sodium to Clexane® after single 100 mg subcutaneous dose: results of a randomized, double-blind, crossover study in healthy volunteers. Drug Des Devel Ther. 2018;12:575–82. https://doi.org/10.2147/DDDT.S162817Pozharitskaya ON, Shikov AN, Faustova NM, Obluchinskaya ED, Kosman VМ, Vuorela H, Makarov VG. Pharmacokinetic and tissue distribution of fucoidan from Fucus vesiculosus after oral administration to rats. Mar Drugs. 2018;16(4):132–42. https://doi.org/10.3390/md16040132Pozharitskaya ON, Shikov AN, Faustova NM, Obluchinskaya ED, Kosman VМ, Vuorela H, Makarov VG. Pharmacokinetic and tissue distribution of fucoidan from Fucus vesiculosus after oral administration to rats. Mar Drugs. 2018;16(4):132–42. https://doi.org/10.3390/md16040132Pozharitskaya ON, Shikov AN, Obluchinskaya ED, Vuorela H. The pharmacokinetics of fucoidan after topical application to rats. Mar Drugs. 2019;17(12):687–96. https://doi.org/10.3390/md17120687Pozharitskaya ON, Shikov AN, Obluchinskaya ED, Vuorela H. The pharmacokinetics of fucoidan after topical application to rats. Mar Drugs. 2019;17(12):687–96. https://doi.org/10.3390/md17120687Косман ВМ, Фаустова НМ, Уракова ИН, Карлина МН, Макаров ВГ. Ингибирование фермента дипептидилпептидазы-4 после перорального введения кроликам экстракта гонад морских ежей (Strongylocentrotus droebachiensis) как возможный биомаркер фармакокинетики. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2020;9(3):158–65. https://doi.org/10.33380/2305-2066-2020-9-3-158-165Kosman VM, Faustova NM, Urakova IN, Karlina MN, Makarov VG. Dypeptydylpeptidase IV activity ingibition after oral administration to rabbits of Strongylocentrotus droebahiensis gonads extract as possible biomarker of pharmakokinetics. Razrabotka i registratsiya lekarstvennykh sredstv = Drug Development and Registration. 2020;9(3):158–65 (In Russ.) https://doi.org/10.33380/2305-2066-2020-9-3-158-165Shikov AN, Pozharitskaya ON, Faustova NM, Kosman VM, Razzazi-Fazeli E, Novak J. Pharmacokinetic study of bioactive glycopeptide from Strongylocentrotus droebachiensis after intranasal administration to rats using biomarker approach. Mar Drugs. 2019;17:577–90. https://doi.org/10.3390/md17100577Shikov AN, Pozharitskaya ON, Faustova NM, Kosman VM, Razzazi-Fazeli E, Novak J. Pharmacokinetic study of bioactive glycopeptide from Strongylocentrotus droebachiensis after intranasal administration to rats using biomarker approach. Mar Drugs. 2019;17:577–90. https://doi.org/10.3390/md17100577Облучинская ЕД. Сухой экстракт фукуса, способ его получения и антикоагулянтная мазь на его основе». Патент Российской Федерации № 2506089; 2014.Obluchinskaya ED. Dry fucus extract, method for preparing it, and base anticoagulant ointment. Patent of the Russian Federation No. 2506089; 2014 (In Russ.)Облучинская ЕД, Карлина МВ, Пожарицкая ОН, Демченко ДВ, Шиков АН, Макарова МН, Макаров ВГ, Фомичев ЮС. Фармацевтическая композиция на основе фукоидана для перорального применения и способ ее получения. Патент Российской Федерации № 2657615 C1; 2018.Obluchinskaya ED, Karlina MV, Pozharitskaya ON, Demchenko DV, Shikov AN, Makarova MN, Makarov VG, Fomichev YuS. Pharmaceutical composition on the basis of fucoidan for oral use and method of its production. Patent of the Russian Federation No. 2657615 C1; 2018 (In Russ.)Пожарицкая ОН, Уракова ИН, Шиков АН, Макаров ВГ. Способ комплексной переработки морских ежей. Патент Российской Федерации № 2432956 С1; 2011.Pozharitskaya ON, Urakova IN, Shikov AN, Makarov VG. Method of complex processing of echinus. Patent of the Russian Federation No. 2432956 C1 (In Russ.)Пожарицкая ОН, Демченко ДВ, Макаров ВГ, Макарова МН, Шиков АН, Кательникова АЕ. Средство с гликозилированным полипептидом и способ его получения. Патент Российской Федерации № 2712235 C1; 2020.Pozharitskaya ON, Demchenko DV, Makarov VG, Makarova MN, Shikov AN, Katel’nikova AE. Agent with a glycosylated polypeptide and a method for production thereof. Patent of the Russian Federation No. 2712235 C1; 2020 (In Russ.)Lin Lu I, Tsai K-C, Chiang Y-K, Jiaang W-T, Wu S-H, Mahindroo N, et al. A three-dimensional pharmacophore model for dipeptidyl peptidase IV inhibitors. Eur J Med Chem. 2008;43(8):1603–11. https://doi.org/10.1016/j.ejmech.2007.11.014Lin Lu I, Tsai K-C, Chiang Y-K, Jiaang W-T, Wu S-H, Mahindroo N, et al. A three-dimensional pharmacophore model for dipeptidyl peptidase IV inhibitors. Eur J Med Chem. 2008;43(8):1603–11. https://doi.org/10.1016/j.ejmech.2007.11.014Пиотровский ВК. Метод статистических моментов и интегральные модельно-независимые параметры фармакокинетики. Фармакология и токсикология. 1986;49(5):118–27.Piotrovsky VK. The method of statistical moments and integral model-independent parameters of pharmacokinetics. Farmakologiya i toksikologiya = Pharmacology and Toxicology. 1986;49(5):118–27 (In Russ.)Zhang Y, Huo M, Zhou J, Xie S. PKSolver: An add-in program for pharmacokinetic and pharmacodynamic data analysis in Microsoft Excel. Comput Methods Programs Biomed. 2010; 99(3):306–14. https://doi.org/10.1016/j.cmpb.2010.01.007Zhang Y, Huo M, Zhou J, Xie S. PKSolver: An add-in program for pharmacokinetic and pharmacodynamic data analysis in Microsoft Excel. Comput Methods Programs Biomed. 2010; 99(3):306–14. https://doi.org/10.1016/j.cmpb.2010.01.007Свежова НВ, Шаркова ВЕ, Громов ДБ, Головаченко ВА, Полынцев ДГ. Методы математической обработки данных в иммуноферментном анализе. 1. Теоретические основы. Клиническая лабораторная диагностика. 2008;(1):3–9.Svezhova NV, Sharkova VE, Gromov DB, Golovachenko VA, Polyntsev DG. Methods for mathematical data processing in enzyme immunoassay. I. Theoretical basis. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika = Clinical Laboratory Diagnostics. 2008;(1):3–9 (In Russ.)Mizuno M, Nishitani Y, Tanoue T, Matoba Y, Ojima T, Hashimoto T, Kanazawa K. Quantification and localization of fucoidan in Laminaria japonica using a novel antibody. Biosci Biotechnol Biochem. 2009;73(2):335–8. https://doi.org/10.1271/bbb.80542Mizuno M, Nishitani Y, Tanoue T, Matoba Y, Ojima T, Hashimoto T, Kanazawa K. Quantification and localization of fucoidan in Laminaria japonica using a novel antibody. Biosci Biotechnol Biochem. 2009;73(2):335–8. https://doi.org/10.1271/bbb.80542Ушакова НА, Морозевич ГЕ, Устюжанина НЕ, Билан МИ, Усов АИ, Нифантьев НЭ, Преображенская МЕ. Антикоагулянтная активность фукоиданов из бурых водорослей. Биомедицинская химия. 2008;54(5):597–606. https://doi.org/10.1134/S1990750809010119Ushakova NA, Morozevich GE, Ustyuzhanina NE, Bilan MI, Usov AI, Nifantiev NE, Preobrazhenskaya ME. Anticoagulant activity of fucoidans from brown algae. Biochem (Mosc.) Suppl Ser B Biomed chem. 2009;(3):77–83 https://doi.org/10.1134/S1990750809010119Irhimeh MR, Fitton JH, Lowenthal RM, Kongtawelert P. A quantitative method to detect fucoidan in human plasmа using a novel antibody. Methods Find Exp Clin Pharmacol. 2005;27(10):705–10. https://doi.org/10.1358/mf.2005.27.10.948919Irhimeh MR, Fitton JH, Lowenthal RM, Kongtawelert P. A quantitative method to detect fucoidan in human plasmа using a novel antibody. Methods Find Exp Clin Pharmacol. 2005;27(10):705–10. https://doi.org/10.1358/mf.2005.27.10.948919Селеменев ВФ, Хохлова ОН, Хохлов ВЮ, Щербинин РЛ. Определение гепарина спектрофотометрическим и фотоколориметрическим методами. Химико-фармацевтический журнал. 1999;(8):47–8. https://doi.org/10.1007/BF02510101Selemenev VF, Khokhlova ON, Khokhlov VYu, Scherbinin RL. Heparin determination by spectrophotometric and photocolorimetric methods. Pharm Chem J. 1999;33(8),450–1 https://doi.org/10.1007/BF02510101Pozharitskaya ON, Shikov AN, Laakso I, Sappanen-Laakso T, Makarenko IE, Faustova NM, Makarova MN, Makarov VG. Bioactivity and chemical characterization of gonads of green sea urchin Strongylocentrotus droebahensis from Barents Sea. J Funct Foods. 2015;17:227–34. https://doi.org/10.1016/j.jff.2015.05.030Pozharitskaya ON, Shikov AN, Laakso I, Sappanen-Laakso T, Makarenko IE, Faustova NM, Makarova MN, Makarov VG. Bioactivity and chemical characterization of gonads of green sea urchin Strongylocentrotus droebahensis from Barents Sea. J Funct Foods. 2015;17:227–34. https://doi.org/10.1016/j.jff.2015.05.030Kashkin V. Therapeutic activity of new drug from hydrobionts in the model of metabolic syndrome in rats. 17th International Congress “Phytopharm”, Vienna, Austria, 8–10 July 2013. Abstract Book.Kashkin V. Therapeutic activity of new drug from hydrobionts in the model of metabolic syndrome in rats. 17th International Congress “Phytopharm”, Vienna, Austria, 8–10 July 2013. Abstract Book.Кательникова АЕ, Крышень КЛ, Макарова МН, Макаров ВГ, Воробьева ВВ, Шиков АН. Изучение специфической фармакологической активности комплекса гликозилированных полипептидов, выделенных из морских ежей вида Strongylocentrotus droebachiensis на модели острого бронхита у крыс. Биомедицина. 2018;(2):85–94.Katelnikova AE, Kryshen KL, Makarova MN, Makarov VG, Vorobieva VV, Shikov AN. Specific pharmacological activity study of glycosylated polypeptide complex extracted from sea urchin Strongylocentrotus droebachiensis in the model of acute bronchitis in rats. Biomeditsina = Biomedicine. 2018;(2):85–94 (In Russ.)Кательникова АЕ, Крышень КЛ, Макарова МН, Макаров ВГ, Шиков АН. Механизмы противовоспалительного действия комплекса полипептидов выделенного из морских ежей вида Strongylocentrotus droebachiensis. Российский иммунологический журнал. 2018;21(1):73–9.Katelnikova AE, Kryshen KL, Makarova MN, Makarov VG, Shikov AN. Mechanisms of anti-inflammatory effect of glycosylated polypeptide complex extracted from sea urchin Strongylocentrotus droebachiensis. Rossiyskiy immunologicheskiy zhurnal = Russian Journal of Immunology. 2018;21(1):73–9 (In Russ.)Кательникова АЕ, Воробьева ВВ, Крышень КЛ, Макаров ВГ, Шиков АН. Противовоспалительная и антиоксидантная активность комплекса гликозилированных полипептидов, выделенных из морских ежей. Медицинский академический журнал. 2016;16(4):183–4.Katelnikova AE, Vorobieva VV, Kryshen KL, Makarov VG, Shikov AN. Antiinflamattory and antioxidative activity of complex of glycosylated polypeptides isolated from sea urchin. Meditsinskiy akademicheskiy zhurnal = Medical Academic Journal. 2016;16(4):183–4 (In Russ.)Кательникова АЕ, Крышень КЛ, Макарова МН, Макаров ВГ, Воробьева ВВ, Пожарицкая ОН, Шиков АН. Изучение специфической фармакологической активности комплекса гликозилированных полипептидов выделенного из морских ежей Strongylocentrotus droebachiensis на модели острого бронхита индуцированного формалином у крыс. Биофармацевтический журнал. 2016;8(6):50–7.Katelnikova AE, Kryshen KL, Makarova MN, Makarov VG, Vorobieva VV, Pozharitskaya ON, Shikov AN. Specific pharmacological activity study of glycosylated polypeptide complex extracted from sea urchin Strongylocentrotus droebachiensis in the model of acute bronchitis induced by formalin in rats. Biofarmatsevticheskiy zhurnal = Russian Journal of Biopharmaceuticals. 2016;8(6):50–7 (In Russ.)Кольман Я, Рем К-Г. Наглядная биохимия. М.: Мир; 2004.Kohlman J, Rem K-G. Visual biochemistry. Moscow: Mir; 2004 (In Russ.)Eventoff W, Rossmann MG, Taylor SS, Torff HJ, Meyer H, Keil W, Kiltz HH. Structural adaptations of lactate dehydrogenase isozymes. Proc Natl Acad Sci USA. 1977;74(7):2677–81. https://doi.org/10.1073/pnas.74.7.2677Eventoff W, Rossmann MG, Taylor SS, Torff HJ, Meyer H, Keil W, Kiltz HH. Structural adaptations of lactate dehydrogenase isozymes. Proc Natl Acad Sci USA. 1977;74(7):2677–81. https://doi.org/10.1073/pnas.74.7.2677Fushinobu S, Kamata K, Iwata S, Sakai H, Ohta T, Matsuzawa H. Allosteric activation of L-lactate dehydrogenase analyzed by hybrid enzymes with effector-sensitive and -insensitive subunits. J Biol Chem. 1996;271(41):25611–6. https://doi.org/10.1074/jbc.271.41.25611Fushinobu S, Kamata K, Iwata S, Sakai H, Ohta T, Matsuzawa H. Allosteric activation of L-lactate dehydrogenase analyzed by hybrid enzymes with effector-sensitive and -insensitive subunits. J Biol Chem. 1996;271(41):25611–6. https://doi.org/10.1074/jbc.271.41.25611Cameron AD, Roper DI, Moreton KK, Kathleen M, Muirhead H, Holbrook JJ, Wigley DB. Allosteric activation in Bacillus stearothermophilus lactate dehydrogenase investigated by an X-ray crystallographic analysis of a mutant designed to prevent tetramerization of the enzyme. J Mol. Biol. 1994:238(4):615–25. https://doi.org/10.1006/jmbi.1994.1318Cameron AD, Roper DI, Moreton KK, Kathleen M, Muirhead H, Holbrook JJ, Wigley DB. Allosteric activation in Bacillus stearothermophilus lactate dehydrogenase investigated by an X-ray crystallographic analysis of a mutant designed to prevent tetramerization of the enzyme. J Mol. Biol. 1994:238(4):615–25. https://doi.org/10.1006/jmbi.1994.1318Fritz PJ. Rabbit muscle lactate dehydrogenase 5; a regulatory enzyme. Science. 1965;150(3694):364–6. https://doi.org/10.1126/science.150.3694.364Fritz PJ. Rabbit muscle lactate dehydrogenase 5; a regulatory enzyme. Science. 1965;150(3694):364–6. https://doi.org/10.1126/science.150.3694.364Карлина МВ, Пожарицкая ОН, Шиков АН. Экспериментальная фармакокинетика, современные требования, исследования in vitro. Международный вестник ветеринарии. 2015;(3):98–102.Karlina MV, Pozharitskaya ON, Shikov AN. Experimental pharmacokinetics, modern requirements, in vitro studies. Mezhdunarodny vestnik veterinarii = International Bulletin of Veterinary Medicine. 2015;(3):98–102 (In Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.