vedomostiregmedРегуляторные исследования и экспертиза лекарственных средствRegulatory Research and Medicine Evaluation3034-30623034-3453Federal State Budgetary Institution ‘Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products’ of the Ministry of Health of the Russian Federation (FSBI ‘SCEEMP’)10.30895/1991-2919-2021-11-2-115-120vedomostiregmed-341Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESОпределение пирогенных примесей в гормональных имплантатах с помощью ЛАЛ-тестаDetection of Pyrogens in Hormonal Implants Using the LAL Testhttps://orcid.org/0000-0001-8615-952XНеугодоваН. П.NeugodovaN. P.

Неугодова Наталия Петровна, кандидат биологических наук

Петровский бульвар, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Natalia P. Neugodova, Cand. Sci. (Biol.)

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

neugodova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0305-7769ШаповаловаО. В.ShapovalovaO. V.

Шаповалова Ольга Владимировна, кандидат фармацевтических наук

Петровский бульвар, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Olga V. Shapovalova, Cand. Sci. (Pharm.)

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

shapovalova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0379-5980СапожниковаГ. А.SapozhnikovaG. A.

Сапожникова Галина Алексеевна

Петровский бульвар, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Galina A. Sapozhnikova

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

sapozhnikova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6728-594XСтепанюкЕ. О.StepanyukE. O.

Степанюк Екатерина Олеговна

Петровский бульвар, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Ekaterina O. Stepanyuk

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

stepanuk@expmed.ruФедеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияScientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal ProductsRussian Federation202129032021112115120Copyright © Неугодова Н.П., Шаповалова О.В., Сапожникова Г.А., Степанюк Е.О., 20212021Неугодова Н.П., Шаповалова О.В., Сапожникова Г.А., Степанюк Е.О.Neugodova N.P., Shapovalova O.V., Sapozhnikova G.A., Stepanyuk E.O.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.vedomostincesmp.ru/jour/article/view/341

Согласно Государственной фармакопее Российской Федерации XIV изд. имплантаты являются стерильной лекарственной формой, для которой обязательным является контроль пирогенности. Однако особенности выполнения анализа для данной лекарственной формы в отечественной фармакопее не описаны.

Цель работы

Цель работы: разработать методику определения содержания бактериальных эндотоксинов (БЭ) с помощью ЛАЛ-теста в имплантатах на примере гормонального препарата с активным веществом гозерелин.

Материалы и методы

Материалы и методы: выполняли процесс экстракции БЭ с поверхности имплантата в водную среду и определяли содержание БЭ в смыве турбидиметрическим кинетическим методом. Затем имплантат растворяли в диметилсульфоксиде и оценивали наличие БЭ в полученном растворе гозерелина с помощью гель-тромб теста.

Результаты

Результаты: на основании существующих в отечественной и зарубежной фармакопейной практике подходов к определению пирогенных примесей в гормональных имплантатах предложено два способа предварительной подготовки образцов для последующего определения содержания БЭ (в смыве и в растворе имплантата). Установлено, что содержание БЭ в водном смыве не превышает 0,01 ЕЭ/мл и составляет менее 0,07 ЕЭ на имплантат. Содержание БЭ в растворе имплантата составило менее 8,3 ЕЭ на 1 мг гозерелина, что почти в 11 раз меньше теоретически рассчитанной нормы.

Выводы

Выводы: разработаны две методики определения БЭ в имплантатах гормональных препаратов с помощью ЛАЛ-теста, пригодные для включения в нормативную документацию. Первая методика предусматривает испытание водного смыва с поверхности имплантата с нормой предельного содержания БЭ «не более 20 ЕЭ/изделие». Вторая методика основана на полном растворении имплантата в диметилсульфоксиде с нормой «не более 97,22 ЕЭ на 1 мг гозерелина».

The State Pharmacopoeia of the Russian Federation, 14th edition states that implants are a sterile dosage form, and have to be tested for pyrogens. However, it does not provide details on how the test should be performed for this dosage form.

The aim of the study was to develop a LAL test procedure for detection of bacterial endotoxins (BE) in implants, using the example of a goserelin product.

Materials and methods

Materials and methods: BE extraction from the implant surface into an aqueous medium was performed with subsequent BE detection in the extract by turbidimetric kinetic test. The implant was then dissolved in dimethyl sulfoxide, and the obtained goserelin solution was tested for BEs using the gel-clot test.

Results

Results: the analysis of the Russian and foreign pharmacopoeial approaches to pyrogenic substance detection in hormonal implants helped to develop two sample preparation procedures for determination of BE content (in the extract and the implant solution). It was demonstrated that the BE content in the water extract did not exceed 0.01 EU/mL and was less than 0.07 EU per implant. The BE content in the implant solution was less than 8.3 EU per 1 mg of goserelin, which is almost eleven-fold lower than the theoretically-derived limit.

Conclusions

Conclusions: the authors developed two test procedures for BE detection in hormonal implants using the LAL test, which could be included in manufacturers’ product files. The first procedure involves testing of the water extract from the implant surface and establishes the BE limit of no more than 20 EU/product. The second procedure involves complete dissolution of the implant in dimethyl sulfoxide and establishes the limit of not more than 97.22 EU per 1 mg of goserelin.

ЛАЛ-тестбактериальные эндотоксиныпирогеныимплантатыгормональные препаратыLAL testbacterial endotoxinspyrogensimplantshormone productsРабота выполнена в рамках государственного задания ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России № 056-00005-21-00 на проведение прикладных научных исследований (номер государственного учета НИР 121021800098-4).The study reported in this publication was carried out as part of a publicly funded research project No. 056-00005-21-00 and was supported by the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products (R&D public accounting No. 121021800098-4).ReferencesOuédraogo M, Semdé R, Somé TI, Ouédraogo M, Ouédraogo R, Henschel V, et al. Development of an in vitro endotoxin test for monoolein–water liquid crystalline gel for use as an implant. Trop J Pharm Res. 2009;8(6):501–8.Ouédraogo M, Semdé R, Somé TI, Ouédraogo M, Ouédraogo R, Henschel V, et al. Development of an in vitro endotoxin test for monoolein–water liquid crystalline gel for use as an implant. Trop J Pharm Res. 2009;8(6):501–8.Сунь В, Чжан С, Ван Т, Лэн Г, Сунь К, Ли Ю, Лиу В. Фармацевтические композиции микросфер гозерелина с пролонгированным высвобождением. Патент Российской Федерации № 2694901C2; 2014.Sun V, Chzhan S, Van T, Sun K, Li Yu, Liu V. Pharmeceutical compositions of Goserelin microspheres with prolonged release. Patent of the Russian Federation No. 2694901C2; 2014 (In Russ.)Бикбов ММ, Файзрахманов РР, Арслангареева ИИ, Салаватова ВФ, Павловский ОА. Особенности действия импланта с дексаметазоном при окклюзии вен сетчатки. Офтальмохирургия. 2018;(2):46–50. https://doi.org/10.25276/0235-4160-2018-2-46-50Bikbov MM, Fayzrakhmanov RR, Arslangareeva II, Salavatova VF, Pavlovsky OA. Action features of the implant with dexamethasone on indicators of retinal vein occlusions. Oftal'mokhirurgiya = Ophthalmic Surgery. 2018;(2):46–50 (In Russ.) https://doi.org/10.25276/0235-4160-2018-2-46-50Пустотина ОА. Чистогестагенная имплантационная контрацепция (обзор международных клинических рекомендаций). Медицинский Совет. 2015;(XX):5–6.Pustotina OA. Progestin-only implant contraception (a review of global clinical guidelines). Meditsinskiy sovet = Medical Council. 2015;(XX):5–6 (In Russ.)Stewart SA, Domínguez-Robles J, Donnelly R, Larrañeta E. Implantable polymeric drug delivery devices: Classification, manufacture, materials, and clinical applications. Polymers (Basel). 2018;10(12):1379. https://doi.org/10.3390/polym10121379Stewart SA, Domínguez-Robles J, Donnelly R, Larrañeta E. Implantable polymeric drug delivery devices: Classification, manufacture, materials, and clinical applications. Polymers (Basel). 2018;10(12):1379. https://doi.org/10.3390/polym10121379Rajgor N, Bhaskar V, Patel M. Implantable drug delivery systems: An overview. Syst Rev Pharm. 2011;2(2):91–5.Rajgor N, Bhaskar V, Patel M. Implantable drug delivery systems: An overview. Syst Rev Pharm. 2011;2(2):91–5.Mazzotti F, Beuttler J, Zeller R, Fink U, Schindler S, Wendel A, et al. In vitro pyrogen test – a new test method for solid medical devices. J Biomed Mater Res A. 2007;80(2):276–82. https://doi.org/10.1002/jbm.a.30922Mazzotti F, Beuttler J, Zeller R, Fink U, Schindler S, Wendel A, et al. In vitro pyrogen test – a new test method for solid medical devices. J Biomed Mater Res A. 2007;80(2):276–82. https://doi.org/10.1002/jbm.a.30922Wallin RF. A practical guide to ISO 10993-11: Systemic Effects. Medical Device and Diagnostic Industry Magazine, July 1998.Wallin RF. A practical guide to ISO 10993-11: Systemic Effects. Medical Device and Diagnostic Industry Magazine, July 1998.Allen D, Clippinger A, Morefield S, Casey W, Ghosh C, Goode J, Brown J. Using the Monocyte Activation Test for medical devices. NICEATM poster: SOT 2019 Annual Meeting.Allen D, Clippinger A, Morefield S, Casey W, Ghosh C, Goode J, Brown J. Using the Monocyte Activation Test for medical devices. NICEATM poster: SOT 2019 Annual Meeting.Borton LK, Coleman KP. Material-mediated pyrogens in medical devices: Applicability of the in vitro Monocyte Activation Test. ALTEX. 2018;35(4):453–63. https://doi.org/10.14573/altex.1709221Borton LK, Coleman KP. Material-mediated pyrogens in medical devices: Applicability of the in vitro Monocyte Activation Test. ALTEX. 2018;35(4):453–63. https://doi.org/10.14573/altex.1709221Silva C, Oliveira C, Carneiro P, Marengo E, Mattos K, Almeida R, et al. Alternative methods for the detection of pyrogens in products and environment subject to public health surveillance: advances and perspectives in Brazil based on the international recognition of the Monocyte Activation. Vigil Sanit Debate. 2018;6(1):137–49. https://doi.org/10.22239/2317-269x.01082Silva C, Oliveira C, Carneiro P, Marengo E, Mattos K, Almeida R, et al. Alternative methods for the detection of pyrogens in products and environment subject to public health surveillance: advances and perspectives in Brazil based on the international recognition of the Monocyte Activation. Vigil Sanit Debate. 2018;6(1):137–49. https://doi.org/10.22239/2317-269x.01082Stang K, Fennrich S, Krajewski S, Stoppelkamp S, Burgener IA, Wendel HP, Post M. Highly sensitive pyrogen detection on medical devices by the monocyte activation test. J Mater Sci: Mater Med. 2014;25(4):1065–75. https://doi.org/10.1007/s10856-013-5136-6Stang K, Fennrich S, Krajewski S, Stoppelkamp S, Burgener IA, Wendel HP, Post M. Highly sensitive pyrogen detection on medical devices by the monocyte activation test. J Mater Sci: Mater Med. 2014;25(4):1065–75. https://doi.org/10.1007/s10856-013-5136-6Williams KL, ed. Endotoxins. Pyrogens, LAL Testing and Depyrogenation. 3rd ed. New York: CRC Press; 2007.Williams KL, ed. Endotoxins. Pyrogens, LAL Testing and Depyrogenation. 3rd ed. New York: CRC Press; 2007.Шаповалова ОВ, Долгова ГВ, Неугодова НП, Сапожникова ГА. Использование органических растворителей для определения показателя «Бактериальные эндотоксины» в фармацевтических субстанциях, нерастворимых в воде. Антибиотики и химиотерапия. 2013;58(9–10):41–4.Shapovalova OV, Dolgova GV, Neugodova NP, Sapozhnikova GA. Organic solvents for determination of bacterial endotoxin index in water-insoluble pharmaceutical substances. Antibiotiki i khimioterapiya = Antibiotics and Chemotherapy. 2013;58(9–10):41–4 (In Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.