vedomostiregmedРегуляторные исследования и экспертиза лекарственных средствRegulatory Research and Medicine Evaluation3034-30623034-3453Federal State Budgetary Institution ‘Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products’ of the Ministry of Health of the Russian Federation (FSBI ‘SCEEMP’)10.30895/1991-2919-2019-9-3-177-183vedomostiregmed-240Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESПрименение метода ВЭЖХ для экспертизы и стандартизации лекарственного растительного сырья «Боярышника цветки»Application of HPLC for Evaluation and Standardisation of Hawthorn Flower Herbal Substancehttps://orcid.org/0000-0002-7818-5303АнтоноваН. П.AntonovaN. P.

Антонова Наталия Петровна, канд. биол. наук

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Natalia P. Antonova, Cand. Sci. (Biol.)

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

nantonova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8389-4799ШеферЕ. П.SheferE. P.

Шефер Елена Павловна, канд. фарм. наук

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Elena P. Shefer, Cand. Sci. (Pharm.)

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

shefer@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6787-0647СеменоваН. Е.SemenovaN. E.

Семенова Наталья Евгеньевна

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Natalia E. Semenova

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

semenova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4980-3248КалининА. М.KalininA. M.

Калинин Артем Михайлович

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Artem M. Kalinin

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

kalinin@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-3278-1994ПрохватиловаС. С.ProkhvatilovaS. S.

Прохватилова Светлана Степановна, канд. фарм. наук

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Svetlana S. Prokhvatilova, Cand. Sci. (Pharm.)

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

prokhvatilova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-3907-3456МоргуновИ. М.MorgunovI. M.

Моргунов Игорь Михайлович

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Igor M. Morgunov

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

morgunov@expmed.ruФедеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияScientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal ProductsRussian Federation20191507201993177183Copyright © Антонова Н.П., Шефер Е.П., Семенова Н.Е., Калинин А.М., Прохватилова С.С., Моргунов И.М., 20192019Антонова Н.П., Шефер Е.П., Семенова Н.Е., Калинин А.М., Прохватилова С.С., Моргунов И.М.Antonova N.P., Shefer E.P., Semenova N.E., Kalinin A.M., Prokhvatilova S.S., Morgunov I.M.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.vedomostincesmp.ru/jour/article/view/240

В рамках гармонизации отечественных и зарубежных подходов и требований к обеспечению качества лекарственных препаратов является актуальным пересмотр внесенных в нормативные и руководящие документы методик контроля качества лекарственных средств. В фармакопейную статью ФС.2.5.0062.18 «Боярышника цветки» Государственной фармакопеи Российской Федерации XIV издания включена методика количественного определения флавоноидов хроматоспектрофотометрическим методом. Данная методика не отвечает современным возможностям науки, имеет ряд недостатков, поэтому возникла необходимость пересмотра существующей методики и разработки нового подхода к стандартизации лекарственного растительного сырья «Боярышника цветки».

Цель работы

Цель работы: разработка методики для стандартизации и экспертизы лекарственного растительного сырья «Боярышника цветки» с использованием метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Материалы и методы

Материалы и методы: объектами исследования служили образцы цветков боярышника отечественных производителей. В качестве стандартных образцов использовали кверцетин (USP RS) и гиперозид (HWI, первичный стандарт). Исследование проводили методом ВЭЖХ на жидкостном хроматографе Infinity II 1260 DAD (Agilent), регистрацию УФ-спектров – на спектрофотометре Cary 100 Varian. Для получения цифровых снимков пластин тонкослойной хроматографии использовали TLC Visualizer (CAMAG).

Результаты

Результаты: разработана методика количественной оценки суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид методом ВЭЖХ в цветках боярышника. Разработанная методика позволяет получать достоверные и воспроизводимые результаты, является высокочувствительной и селективной. На основе полученных результатов количественной оценки суммы флавоноидов боярышника цветков предложены нормы содержания суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид – «не менее 0,5 %».

Выводы

Выводы: разработанная методика количественного определения действующих веществ препарата «Боярышника цветки» методом ВЭЖХ может быть рекомендована для включения в раздел «Количественное определение» фармакопейной статьи «Боярышника цветки» Государственной фармакопеи Российской Федерации.

The process of harmonisation of Russian and foreign approaches and requirements in the field of medicines quality assurance calls for revision of quality control procedures included in various regulations and guidelines. The monograph FS.2.5.0062.18 “Hawthorn flowers” of the State Pharmacopoeia of the Russian Federation XIV edition includes a test procedure for determination of flavonoids by a chromatospectrophotometric method. This procedure does not take into account current scientific capabilities and has a number of shortcomings, therefore it was necessary to revise the existing test procedure and develop a new approach to the standardisation of the hawthorn flower herbal substance.

The objective of the study was to develop an assay method for standardisation and evaluation of hawthorn flower using high performance liquid chromatography (HPLC).

Materials and methods

Materials and methods: the study was performed using samples of hawthorn flowers by Russian manufacturers. Quercetin (USP RS) and Hyperoside (HWI, primary standard) were used as the reference standards. The HPLC analysis was performed using an Infinity II 1260 DAD LC system (Agilent), and the UV spectra were recorded on a Cary 100 Varian spectrophotometer. A TLC Visualizer (CAMAG) was used to obtain digital images of thin layer chromatography plates.

Results

Results: the authors developed an HPLC test procedure for quantitative determination of total flavonoids, expressed as hyperoside, in hawthorn flowers. The developed procedure gives reliable and reproducible results and is characterised by high sensitivity and selectivity. The results of quantitative determination of the total flavonoid content in hawthorn flowers were used to propose the standard for the total content of flavonoids, expressed as hyperoside, of “not less than 0.5%”.

Conclusions

Conclusions: the developed assay method for determination of active pharmaceutical ingredients in hawthorn flower products by HPLC can be recommended for inclusion into the Assay part of the “Hawthorn Flowers” monograph of the State Pharmacopoeia of the Russian Federation.

лекарственное растительное сырьебоярышника цветкифлавоноидыгиперозидкверцетинВЭЖХфармакопейные методы анализастандартизацияколичественное определениеherbal substancehawthorn flowerflavonoidshyperosidequercetinHPLCpharmacopoeial test methodsstandardisationassayРабота выполнена в рамках государственного задания ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России № 056-00154-19-00 на проведение прикладных научных исследований (номер государственного учета НИР AAAA-A18-118021590049-0).The study reported in this publication was carried out as part of a publicly funded research project No. 056-00154-19-00 and was supported by the FSBI «SCEEMP» of the Ministry of Health of Russia (R&D public accounting No. AAAA-A18-118021590049-0).ReferencesСаканян ЕИ, Ковалева ЕЛ, Фролова ЛН, Шелестова ВВ. Современные требования к качеству лекарственных средств растительного происхождения. Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. 2018;8(3):170–8. https://doi.org/10.30895/1991-2919-2018-8-3-170-178Sakanyan EI, Kovaleva EL, Frolova LN, Shelestova VV. Current requirements for the quality of herbal medicinal products. Vedomosti Nauchnogo tsentra ekspertizy sredstv meditsinskogo primeneniya = Тhе Bulletin of the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products. 2018;8(3):170–8 (In Russ.) https://doi.org/10.30895/1991-2919-2018-8-3-170-178Куркина АВ. Актуальные вопросы химической стандартизации лекарственных растений, содержащих флавоноиды. Фармация. 2012;(7):44–8.Kurkina AV. Chemical standardization of medicinal plants containing flavonoids: topical issues. Farmatsiya = Pharmacy. 2012;(7):44–8 (In Russ.)Куркин ВА, Авдеева ЕВ, Куркина АВ, Правдивцева ОЕ, Браславский ВБ, Егоров МВ, Рыжов ВМ. Фенольные соединения как критерий подлинности и качества лекарственного растительного сырья и фитопрепаратов. Традиционная медицина. 2014;(4):39–42a.Kurkin VA, Avdeeva EV, Kurkina AV, Pravdivtseva OE, Braslavsky VB, Egorov MV, Ryzhov VM. The phenolic compounds as the criteria of identity and quality of the herbal drugs and phytopharmaceuticals. Traditsionnaya meditsina = Traditional Medicine. 2014;(4):39–42a (In Russ.)Куркин ВА, Куркина АВ, Авдеева ЕВ. Флавоноиды как биологически активные соединения лекарственных растений. Фундаментальные исследования. 2013;(11):1897–901.Kurkin VA, Kurkina AV, Avdeeva EV. The flavonoids as biologically active compounds of medical plants. Fundamentalnye issledovaniya = Fundamental Research. 2013;(11):1897–901 (In Russ.)Куркина АВ. Определение содержания суммы флавоноидов в плодах боярышника. Химико-фармацевтический журнал. 2014;48(12):27–30. https://doi.org/10.30906/0023-1134-2014-48-12-27-30Kurkina AV. Determination of total flavonoids in hawthorn fruits. Khimiko-farmatsevticheskiy zhurnal = Pharmaceutical Chemistry Journal. 2014;48(12):27–30 (In Russ.) https://doi.org/10.30906/0023-1134-2014-48-12-27-30Куркин ВА, Правдивцева ОЕ, Морозова ТВ, Жавкина ТМ, Розно СА, Рузаева ИВ, Помогайбин АВ. Содержание суммы флавоноидов в цветках и плодах различных видов рода боярышник. В кн.: Фармацевтическая ботаника: современность и перспективы. II Межвузовская научно-практическая конференция (7 октября 2017 г.). Сборник материалов. Самара: Самарский государственный медицинский университет Минздрава России; 2017. С. 52–6.Kurkin VA, Pravdivtseva OE, Morozova TV, Zhavkina TM, Rozno SA, Ruzaeva IV, Pomogaybin AV. The content of total flavonoids in flowers and fruits of different species of the hawthorn genus. In: Pharmaceutical botany: present state and future prospects. II Interuniversity scientific and practical conference (7 October 2017). Materials. Samara: Samara State Medical University; 2017. P. 52–6 (In Russ.)Ляхова НС, Арльт АВ, Ивашев МН. Влияние фракций из плодов боярышника на мозговой кровоток. В кн.: Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции. Сборник научных трудов. Пятигорск: Пятигорская государственная фармацевтическая академия; 2005. С. 378–9.Lyakhova NS, Arl’t AV, Ivashev MN. The effect of fractions from hawthorn fruit on cerebral blood flow. In: Development, research and marketing of new pharmaceutical products. Collection of scientific papers. Pyatigorsk: Pyatigorsk State Pharmaceutical Academy; 2005. P. 378–9 (In Russ.)Самылина ИА, Сорокина АА, Пятигорская НВ. Боярышник (Crataegus): возможности медицинского применения. Фарматека. 2010;(8):83–5.Samylina IA, Sorokina AA, Pyatigorskaya NV. Hawthorn (Crataegus): options for medical use. Farmateka = Pharmateca. 2010;(8):83–5 (In Russ.)Кожанова КК, Лесова ЖТ, Мухтарова А, Багдат А. Боярышник — состав, лечебные свойства и применение (обзор). Интернаука. 2018;(21-1):25–7.Kozhanova KK, Lesova ZhT, Mukhtarova A, Bagdat A. Hawthorn — composition, medicinal properties and application (review). Internauka = Interscience. 2018;(21-1):25–7 (In Russ.)Морозова ТВ, Куркин ВА, Правдивцева ОЕ. Актуальные проблемы химической стандартизации сырья лекарственных растений рода боярышник (Сrataegus L.). Фармация и фармакология. 2018;6(2):104–20.Morozova TV, Kurkin VA, Pravdivtseva OE. Actual problems of raw materials chemical standardization of medicinal plants of the genus hawthorn (Crataegus L.). Farmatsiya i farmakologiya = Pharmacy and Pharmacology. 2018;6(2):104–20 (In Russ.)Куркина АВ. Актуальные аспекты стандартизации лекарственного растительного сырья, содержащего флавоноиды. Бюллетень сибирской медицины. 2011;10(5):150–4.Kurkina AV. Actual aspects of standardization of medicinal vegetative raw materials containing flavonoids. Bulleten sibirskoy meditsiny = Тhе Bulletin of Siberian Medicine. 2011;10(5):150–4 (In Russ.)Куркина АВ. Современная стандартизация как методологическая основа рационального использования ресурсов лекарственных растений, содержащих флавоноиды. Известия Самарского научного центра Российской академии наук. 2012;14(1-9):2253–6.Kurkina AV. Modern standardization as the methodological basis of rational use the medical plants, containing flavonoids. Izvestiya Samarskogo nauchnogo tsentra Rossiyskoy akademii nauk = Izvestia of Samara Scientific Center of the Russian Academy of Sciences. 2012;14(1-9):2253–6 (In Russ.)Куркина АВ. Новые подходы к стандартизации цветков боярышника. Химия растительного сырья. 2013;(2):171–6.Kurkina AV. The new approaches to the standardization of Crataegus flowers. Khimiya rastitel’nogo syriya = Chemistry of Plant Raw Materials. 2013;(2):171–6 (In Russ.)Родионова ТВ, Хишова ОМ. Стандартизация листьев боярышника. Вестник фармации. 2008;(2):70–9.Rodionova TV, Khishova OM. Standardization of hawthorn leaves. Vestnik farmatsii = The Bulletin of Pharmacy. 2008;(2):70–9 (In Russ.)Сагарадзе ВА, Бабаева ЕЮ, Каленикова ЕИ. Определение флавоноидов в цветках с листьями боярышника методом ВЭЖХ со спектрофотометрическим детектированием. Химико-фармацевтический журнал. 2017;51(4):30–3. https://doi.org/10.30906/0023-1134-2017-51-4-30-33Sagaradze VA, Babaeva EYu, Kalenikova EI. HPLC-UV method for determining flavonoids in hawthorn flowers and leaves. Khimiko-farmatsevticheskiy zhurnal = Pharmaceutical Chemistry Journal. 2017;51(4):30–3 (In Russ.). https://doi.org/10.30906/0023-1134-2017-51-4-30-33Салахов ИА, Гармонов СЮ. Определение флавоноидов боярышника в лекарственных формах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Вестник Казанского технологического университета 2017;(6):22–7.Salakhov IA, Garmonov SYu. Determination of hawthorn flavonoids in medicinal forms by high-performance liquid chromatography. Vestnik Kazanskogo tehnologicheskogo universiteta = The Bulletin of Kazan Technological University. 2017;(6):22–7 (In Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.