vedomostiregmedРегуляторные исследования и экспертиза лекарственных средствRegulatory Research and Medicine Evaluation3034-30623034-3453Federal State Budgetary Institution ‘Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products’ of the Ministry of Health of the Russian Federation (FSBI ‘SCEEMP’)10.30895/1991-2919-2019-9-1-54-63vedomostiregmed-214Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESРазработка методик подтверждения подлинности фармацевтических субстанций трипторелина ацетат и гозерелина ацетат методом ЯМР-спектроскопииDevelopment of identification test methods for triptorelin acetate and goserelin acetate substances using NMR spectroscopyhttps://orcid.org/0000-0003-1310-4477МоисеевС. В.MoiseevS. V

канд. хим. наук, доцент, ведущий эксперт сектора спектральных методов анализа лаборатории биотехнологических препаратов Испытательного центра экспертизы качества лекарственных средств 

Петровский бульвар, д. 8, стр. 2, Москва, 127051, Российская Федерация

Cand. Sci. (Chem.), Leading Expert of the Spectral Methods Sector of the Laboratory of Biotechnological Products of the Testing Centre for Evaluation of Medicinal Products’ Quality 

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051, Russian Federation

MoiseevSV@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-9133-0835КузьминаН. Е.Kuz’minaN. E.

д-р хим. наук, начальник сектора спектральных методов анализа лаборатории биотехнологических препаратов Испытательного центра экспертизы качества лекарственных средств 

Петровский бульвар, д. 8, стр. 2, Москва, 127051, Российская Федерация

Dr. Sci. (Chem.), Head of the Spectral Methods Sector of the Laboratory of Biotechnological Products of the Testing Centre for Evaluation of Medicinal Products’ Quality 

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051, Russian Federation

KuzminaN@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8752-5245ЛутцеваА. И.LuttsevaA. I.

канд. фарм. наук, начальник Испытательного центра экспертизы качества лекарственных средств 

Петровский бульвар, д. 8, стр. 2, Москва, 127051, Российская Федерация

Cand. Sci. (Pharm.), Head of the Testing Centre for Evaluation of Medicinal Products’ Quality 

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051, Russian Federation

Lutceva@expmed.ruФедеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения»РоссияScientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal ProductsRussian Federation201920022019915463Copyright © Моисеев С.В., Кузьмина Н.Е., Лутцева А.И., 20192019Моисеев С.В., Кузьмина Н.Е., Лутцева А.И.Moiseev S.V., Kuz’mina N.E., Luttseva A.I.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.vedomostincesmp.ru/jour/article/view/214

Работа является продолжением исследования по внедрению метода ЯМР-спектроскопии в контроль качества фармацевтических субстанций природных пептидных гормонов и их синтетических аналогов. Цель работы: разработка методик подтверждения подлинности фармацевтических субстанций трипторелина ацетата и гозерелина ацетата методом ЯМР-спектроскопии без использования стандартных образцов для их дальнейшего использования в фармакопейном анализе. Материалы и методы: при разработке методики были использованы методы двумерной ЯМР-спектроскопии (1H-1H gCOSY, 1H-13C gHSQC, 1H-13C gHMBC). Результаты: в процессе исследования проведено соотнесение сигналов 1Н и 13С ЯМР-спектров конкретному структурному фрагменту молекулы, определен аминокислотный состав и установлена аминокислотная последовательность каждого олигопептида. Выводы: составлена таблица структурного соотнесения сигналов спектров ЯМР, позволяющая использовать метод ЯМР для подтверждения подлинности фармацевтических субстанций трипторелина ацетат и гозерелина ацетат без использования фармакопейных стандартных образцов. Подобраны оптимальные температурные условия для регистрации 13C ЯМР-спектров (27 и 50 °С для трипторелина ацетата и гозерелина ацетата соответственно). Показана целесообразность использования в фармакопейном анализе методики подтверждения подлинности, основанную на методе 13C ЯМР-спектроскопии.

The work is a continuation of the research on the use of NMR spectroscopy in the quality control of natural peptide hormone-based active substances and their synthetic analogues. The aim of the paper was to develop identification test methods for triptorelin acetate and goserelin acetate substances using NMR spectroscopy that does not require reference standards ‒ with the aim of using the newly developed test methods in pharmacopoeial analysis. Materials and methods: the procedure was developed using two-dimensional NMR spectroscopy (1H-1H gCOSY, 1H-13C gHSQC, 1H-13C gHMBC). Results: thestudy made it possible to assign 1H and 13C NMR signals to a specific molecular fragment, and to determine the amino acid composition of each oligopeptide. Conclusions: the authors drew up a table showing structural assignment of NMR signals, which makes it possible to use the NMR method for identification testing of triptorelin acetate and goserelin acetate substances without the use of pharmacopoeial reference standards. The study helped to determine the optimal temperature conditions for recording 13C NMR spectra (27 °С and 50 °С for triptorelin acetate and goserelin acetate, respectively). It was demonstrated that 13C NMR spectroscopy could be used for identification testing in pharmacopoeial analysis.  

трипторелина ацетатгозерелина ацетатЯМР-спектроскопияподлинностьвнутримолекулярное взаимодействиеtriptorelin acetategoserelin acetateNMR spectroscopyidentificationintramolecular interactionРабота выполнена в рамках государственного задания ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России № 056-00154-19-00 на проведение прикладных научных исследований (номер государственного учета НИР AAAAA18-118021590049-0).The study reported in this publication was carried out as part of a publicly funded research project No. 056-00023-18-02 and was supported by the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products (R&D public accounting No. AAAA-A18-118021590049-0).ReferencesКузьмина НЕ, Моисеев СВ, Крылов ВИ, Яшкир ВА, Меркулов ВА. Разработка методики подтверждения подлинности фармацевтической субстанции «бусерелина ацетат» методом ЯМР-спектроскопии без использования фармакопейного стандартного образца. Антибиотики и химиотерапия. 2017;62(9–10):40–6.Kuz’mina NE, Moiseev SV, Krylov VI, Yashkir VA, Merkulov VA. Development of a procedure for the identification of pharmaceutical substance buserelin acetate by NMR spectroscopy without using pharmacopoeia reference standard. Antibiotiki i Khimioterapiya 2017; 62(9-10): 40-46 (in Russ.).Кузьмина НЕ, Моисеев СВ, Крылов ВИ, Дерябин АС, Яшкир ВА, Меркулов ВА. Валидация методики подтверждения подлинности фармацевтической субстанции «бусерелина ацетат» методом ЯМР-спектроскопии. Химико-фармацевтический журнал. 2018;52(2):48–53. https://doi.org/10.30906/0023-1134-2018-52-2-48-53 https://doi.org/10.1007/s11094-018-1783-8Kuz’mina NE, Moiseev SV, Krylov VI, Deryabin AS, Yashkir VA, Merkulov VA. Validation of an NMR-Spectroscopic Method for Authenticity Confirmation of Buserelin Acetate Pharmaceutical Substance. Pharmaceutical Chemistry Journal. 2018; 52(2): 48-53; (in Russ.). https://doi.org/10.30906/0023-1134-2018-52-2-48-53.Ковалева СВ, Исаева ИВ, Лутцева АИ, Аладышева ЖИ, Пихтарь АВ. Проблемы стандартизации гормональных препаратов пептидно-белковой природы. Российский химический журнал. 2005;49(1):135–45.Kovaleva SV, Isaeva IV, Lutseva AI, Aladysheva GI, Pikhtar AV. Problems for standardization of hormonal preparations of protein-peptide nature. Russian Journal of General Chemistry. 2005; XLIX(1):135-145 (in Russ.).Матвеев БП. Роль трипторелина (диферелин) в лечении рака предстательной железы. Онкоурология. 2008;(4):53–6.Matveyev BP. The Role of Triptorelin (Diphereline) in the Treatment of Prostate Cancer. Oncourology. 2008; (4): 53-56 (in Russ.).Frampton JE. Triptorelin: a review of its use as an adjuvant anticancer therapy in early breast cancer. Drugs. 2017;77(18):2037–48. https://doi.org/10.1007/s40265-017-0849-3Frampton JE. Triptorelin: A Review of its Use as an Adjuvant Anticancer Therapy in Early Breast Cancer. Drugs. 2017; 77(18):2037-2048.Venturelli M, Guaitoli G, Omarini C, Moscetti L. Spotlight on triptorelin in the treatment of premenopausal women with early-stage breast cancer. Breast Cancer (Dove Med Press). 2018;(10):39–49. https://doi.org/10.2147/BCTT.S137508Venturelli M, Guaitoli G, Omarini C, Moscetti L. Spotlight on triptorelin in the treatment of premenopausal women with early-stage breast cancer. Breast Cancer: Targets and Therapy 2018; 10: 39-49.Choktanasiri W, Boonkasemsanti W, Sittisomwong T, Kunathikom S, Suksompong S, Udomsubpayakul U, Rojanasakul A. Long-acting triptorelin for the treatment of endometriosis. Int J Gynaecol Obstet. 1996;54(3):237–43. PMID:8889631Choktanasiri W, Boonkasemsanti W, Sittisomwong T, Kunathikom S, Suksompong S, Udomsubpayakul U, Rojanasakul A. Long-acting triptorelin for the treatment of endometriosis. Int. J Gynaecol Obstet. 1996; 54(3):237-43.Высоцкая НВ, Максимов КВ. Адъювантная эндокринотерапия рака молочной железы у группы больных пременопаузного возраста. Опухоли женской репродуктивной системы. 2007;(1–2):45–7.Vysotskaya IV, Maksimov KV. Adjuvant endocrine therapy for breast cancer in a group of premenopausal patients. Opukholy Zhenskoi Reproduktivnoi Systemy. 2007; (102): 45-47 (in Russ.).Wu S, Li Q, Zhu Y, Sun J, Li F, Lin H, Guan X, He Z. Role of goserelin in combination with endocrine therapy for the treatment of advanced breast cancer in premenopausal women positive for hormone receptor: a retrospective matched case-control study. Cancer Biother Radiopharm. 2013;28(10):697–702. https://doi.org/10.1089/cbr.2012.1436Sangang Wu, Qun Li, Yuliang Zhu, Jiayuan Sun, Fengyan Li, Huanxin Lin, Xunxing Guan, and Zhenyu He. Role of Goserelin in Combination with Endocrine Therapy for the Treatment of Advanced Breast Cancer in Premenopausal Women Positive for Hormone Receptor: A Retrospective Matched Case–Control Study Cancer Biother Radiopharm. 2013; 28(10): 697–702.Gottlieb HE, Kotlyar V, Nudelman A. NMR chemical shifts of common laboratory solvents as trace impurities. J Org Chem. 1997;62(21):7512–5. https://doi.org/10.1021/jo971176vGottlieb HE, Kotlyar V, and Nudelman A. NMR Chemical Shifts of Common Laboratory Solvents as Trace Impurities. J. Org. Chem. 1997; 62(21): 7512 - 7515.General monograph 2.2.64 Peptide identification by nuclear magnetic resonace. in: European Pharmacopoeia, 9th ed. V.1. Strasbourg: European Department for the Quality of Medicines & Health Care; 2016. p. 112.General monograph 2.2.64 Peptide identification by nuclear magnetic resonace. in: European Pharmacopoeia, 9th ed. V.1. Strasbourg: European Department for the Quality of Medicines & Health Care; 2016. p. 112.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.