vedomostiregmedРегуляторные исследования и экспертиза лекарственных средствRegulatory Research and Medicine Evaluation3034-30623034-3453Federal State Budgetary Institution ‘Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products’ of the Ministry of Health of the Russian Federation (FSBI ‘SCEEMP’)10.30895/1991-2919-2018-8-3-193-200vedomostiregmed-203Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESМЕТОДОЛОГИЧЕСКИЙ ПОДХОД К ПЛАНИРОВАНИЮ ЭКСПЕРИМЕНТА ПРИ ВЫБОРЕ КАЧЕСТВЕННЫХ РЕАКЦИЙ ДЛЯ ПОДТВЕРЖДЕНИЯ ПОДЛИННОСТИ КОМПОНЕНТОВ ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА (НА ПРИМЕРЕ АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ)A METHODOLOGICAL APPROACH TO DESIGNING EXPERIMENTS WHEN DEALING WITH IDENTIFICATION TESTS FOR MEDICINAL PRODUCT COMPONENTS (AS ILLUSTRATED BY ASCORBIC ACID)https://orcid.org/0000-0001-6295-6292ПуримЮ. Б.PurimYu. B.

Пурим Юлия Борисовна – кандидат фармацевтических наук, ведущий эксперт лаборатории химико-фармацевтических препаратов № 1 Испытательного центра экспертизы качества лекарственных средств ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России.

Петровский бульвар, д. 8, стр. 2, Москва,  127051.

Yulia B. Purim - Cand. Sci. (Pharm.), Leading Expert of the Laboratory of Chemical Pharmaceutical Preparations No. 1 of the Testing Centre for Evaluation of Medicinal Products’ Quality of the FSBI «SCEEMP» of the Ministry of Health of Russia.

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051.

Purim@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0001-7601-6031КругляковаМ. Л.KruglyakovaM. L.

Круглякова   Марина Леонидовна - эксперт 2-й категории лаборатории химико-фармацевтических препаратов № 1 Испытательного центра экспертизы качества лекарственных средств ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России.

Петровский бульвар, д. 8, стр. 2, Москва,  127051.

Marina L. Kruglyakova - 2nd Professional Category Expert of the Laboratory of Chemical Pharmaceutical Preparations No. 1 of the Testing Centre for Evaluation of Medicinal Products’ Quality of the FSBI «SCEEMP» of the Ministry of Health of Russia.

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051.

Kruglyakova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9923-7355БулановаЛ. Н.BulanovaL. N.

Буланова  Людмила Николаевна - эксперт 1-й категории лаборатории химико-фармацевтических препаратов № 1 Испытательного центра экспертизы качества лекарственных средств ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России.

Петровский бульвар, д. 8, стр. 2, Москва,  127051.

Lyudmila N. Bulanova - 1st Professional Category Expert of the Laboratory of Chemical Pharmaceutical Preparations No. 1 of the Testing Centre for Evaluation of Medicinal Products’ Quality of the FSBI «SCEEMP» of the Ministry of Health of Russia.

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051.

Bulanova@expmed.ruАгапкинаМ. В.AgapkinaM. V.

Агапкина Маргарита Васильевна - эксперт 1-й категории лаборатории химико-фармацевтических препаратов № 1 Испытательного центра экспертизы качества лекарственных средств ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России.

Петровский бульвар, д. 8, стр. 2, Москва,  127051.

Margarita V. Agapkina - 1st Professional Category Expert of the Laboratory of Chemical Pharmaceutical Preparations No. 1 of the Testing Centre for Evaluation of Medicinal Products’ Quality of the FSBI «SCEEMP» of the Ministry of Health of Russia.

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051.

Agapkina@epxmed.ruhttps://orcid.org/0000-0001-5598-5132СтроноваЛ. А.StronovaL. N.

Стронова Лариса Александровна - кандидат фармацевтических наук, главный эксперт лаборатории  химико-фармацевтических препаратов  № 1 Испытательного центра экспертизы качества лекарственных средств ФГБУ «НЦЭСМП»  Минздрава России.

Петровский бульвар, д. 8, стр. 2, Москва,  127051.

Larisa A. Stronova - Cand. Sci. (Pharm.), Chief Expert of the Laboratory of Chemical Pharmaceutical Preparations No. 1 of the Testing Centre for Evaluation of Medicinal Products’ Quality of the FSBI «SCEEMP» of the Ministry of Health of Russia.

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051.

stronova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1560-3424БоковиковаТ. Н.BokovikovaT. N.

Боковикова Татьяна Николаевна - доктор фармацевтических наук, начальник лаборатории химико-фармацевтических препаратов № 1 Испытательного центра экспертизы качества лекарственных средств ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России.

Петровский бульвар, д. 8, стр. 2, Москва,  127051.

Tatiana N. Bokovikova - Dr. Sci. (Pharm.), Head of the Laboratory of Chemical Pharmaceutical Preparations  No. 1 of the Testing Centre for Evaluation of Medicinal Products’ Quality of the FSBI «SCEEMP» of the Ministry of Health of Russia.

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051.

 

Bokovikova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0942-7049ГерниковаЕ. П.GernikovaE. P.

Герникова  Евгения  Петровна,  канд.  фарм. наук, главный  эксперт лаборатории  химико-фармацевтических препаратов  № 1 Испытательного центра экспертизы качества лекарственных средств ФГБУ «НЦЭСМП»  Минздрава России.

Петровский бульвар, д. 8, стр. 2, Москва,  127051.

Evgenia P. Gernikova - Cand. Sci. (Pharm.), Chief Expert of the Laboratory of Chemical Pharmaceutical Preparations No. 1 of the Testing Centre for Evaluation of Medicinal Products’ Quality of the FSBI «SCEEMP» of the Ministry of Health of Russia.

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051.

Gernikova@expmed.ruФедеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияScientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal ProductsRussian Federation20182008201883193200Copyright © Пурим Ю.Б., Круглякова М.Л., Буланова Л.Н., Агапкина М.В., Стронова Л.А., Боковикова Т.Н., Герникова Е.П., 20182018Пурим Ю.Б., Круглякова М.Л., Буланова Л.Н., Агапкина М.В., Стронова Л.А., Боковикова Т.Н., Герникова Е.П.Purim Y.B., Kruglyakova M.L., Bulanova L.N., Agapkina M.V., Stronova L.N., Bokovikova T.N., Gernikova E.P.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.vedomostincesmp.ru/jour/article/view/203

Необходимость подтверждения подлинности  действующих  или  вспомогательных веществ  многокомпонентных лекарственных средств,  в том числе с использованием качественных  реакций, влечет за собой  необходимость  проведения исследований по выбору реакций  и условий их проведения с учетом мешающего  влияния других компонентов лекарственного средства  и количества  используемого образца.  Цель работы: разработка  методологического подхода к планированию эксперимента при выборе  качественных  реакций  для подтверждения подлинности определяемого компонента лекарственного средства на основании результатов исследований возможности использования известных качественных  реакций  (на примере  аскорбиновой кислоты  в многокомпонентном лекарственном средстве — 0,4 мг аскорбиновой кислоты / 100 мг содержимого  флакона) с учетом мешающего влияния других компонентов лекарственного средства и количества  используемого образца.  Материалы и методы: в качестве  объекта исследования было выбрано  многокомпонентное лекарственное средство  — лиофилизат для приготовления раствора  для внутривенного и внутримышечного введения  с лекарственным веществом,  обладающим  противовоспалительным действием,  в состав которого  входит аскорбиновая кислота  в качестве  стабилизатора (антиоксиданта). В результате анализа  данных литературы  выбраны  качественные реакции  для проведения исследований возможности их использования для подтверждения  подлинности аскорбиновой кислоты  в изучаемом  лекарственном средстве.  Проведена  экспериментальная проверка  реакций, основанных на кислотных  и восстановительных свойствах аскорбиновой кислоты.  Результаты: установлено, что в изучаемом многокомпонентном лекарственном средстве для подтверждения подлинности аскорбиновой кислоты могут быть применимы несколько известных качественных реакций: реакции образования аскорбината железа и восстановления нитрата серебра до металлического серебра после предварительного отделения аскорбиновой кислоты  от других компонентов лекарственного средства,  а также реакция  образования берлинской лазури,  йодная проба и реакция  с раствором  перманганата калия,  не требующие  дополнительной пробоподготовки. Использование реакций  с раствором  метиленового  синего и реактивом  Фелинга  применительно к данному лекарственному средству нецелесообразно, так как результат указанных реакций  слабо выражен. Выводы: на примере многокомпонентного лекарственного средства разработан  методологический подход к выбору качественных  реакций  для подтверждения подлинности одного  из компонентов лекарственного средства  (например, аскорбиновой кислоты).  Алгоритм действий включает в себя выбор реакций, определение их чувствительности и целесообразности применения для конкретного лекарственного средства,  изучение  влияния других его компонентов на результат химической реакции, а также необходимость  или отсутствие дополнительной пробоподготовки. Совокупность проведенных  исследований позволяет сделать выбор качественных  реакций  и оптимальных  условий  их проведения для достижения поставленной цели — подтверждения подлинности определяемого вещества.

The need for identification  testing of active substances or excipients in multi-component medicinal products,  including the use of qualitative tests, calls for research substantiating the choice of tests and test conditions  with due regard to interference  effects caused by other components  of medicinal products and the amount of the sample used. The aim of the study was to develop a methodological approach to designing experiments while selecting qualitative reactions for identification testing of a medicinal product component based on the results of studies investigating the possibility of using known qualitative tests (as illustrated by ascorbic acid in a multi-component product — 0.4 mg of ascorbic acid per 100 mg of the vial contents)  with due regard to interference on the part of other medicinal product components and the amount of the sample used. Material and methods: the study focused on a multi-component medicinal product — lyophilisate for solution for intravenous and intramuscular  injections containing an antiinflammatory active substance and ascorbic acid as a stabilizing agent (antioxidant). The analysis of literature sources helped to determine qualitative tests that were assessed for potential use for identification testing of ascorbic acid as a component of the analysed medicinal product. The study involved experimental testing of the qualitative reactions based on acidic and reducing properties of ascorbic acid. Results: it was demonstrated that several well-known qualitative tests could be used for identification  testing of ascorbic acid as a component of the analysed medicinal product,  namely, the reaction of ferrous ascorbate formation  and the reaction of silver nitrate reduction to metallic silver after preliminary separation of ascorbic acid from the other medicinal product components, as well as the reaction of Prussian blue formation,  iodine test and reaction with a potassium permanganate solution, which do not require additional sample preparation.  It is not practicable to use the reaction with a methylene blue solution and the Fehling’s reagent reaction for this particular medicinal product,  since their results are feeble. Conclusions: the analysis of the multi-component medicinal product helped to develop a methodological  approach to choosing qualitative reactions for identification testing of one of the medicinal product’s components  (e.g., ascorbic acid). The suggested algorithm includes the choice of reactions, determination of their sensitivity and applicability for a particular medicinal product, analysis of the other components’ effects on the results of the chemical reaction,  and the need for additional sample preparation.  The whole complex of the studies performed helped to determine qualitative reactions and optimal conditions for identification testing of the analysed substance.

методологический подходкачественные реакцииусловия проведения испытанияаскорбиновая кислотаантиоксидантпарентеральные лекарственные средстваmethodological approachqualitative reactionstest conditionsascorbic acidantioxidantparenteralsФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава РоссииFSBI “SCEEMP” of the Ministry of Health of RussiaReferencesГосударственная фармакопея Российской Федерации. XIII изд. Т. 1–3. М.; 2015.The State pharmacopoeia of the Russian Federation. 13th ed. V. 1–3. Moscow; 2015 (In Russ.)Авдеева ЖИ, Солдатов АА, Алпатова НА, Киселевский МВ, Лысикова СЛ, Бондарев ВП и др. Биоаналоговые (биоподобные) лекарственные препараты рекомбинантного гранулоцитарного-колониестимулирующего фактора. Оценка качества. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2015;(1):4–14.Avdeeva ZhI, Soldatov AA, Alpatova NA, Kiselevsky MV, Lysikova SL, Bondarev VP, et al. Recombinant granulocyte colony stimulating factor biosimilars. Quality assessment. BIOpreparaty. Profilaktika, diagnostika, lechenie = BIOpreparations. Prevention, Diagnosis, Treatment. 2015;(1):4–14 (In Russ.)Hima V, Rubesh Kumar S, Duganath N, Devanna N. Quantization of ascorbic acid in ayurvedic amla capsule by various analytical techniques. Der Pharma Chemica. 2013;5(3):8–17.Hima V, Rubesh Kumar S, Duganath N, Devanna N. Quantization of ascorbic acid in ayurvedic amla capsule by various analytical techniques. Der Pharma Chemica. 2013;5(3):8–17.Neuberger S, Jooß K, Flottmann D, Scriba G, Neusüß C. Raman spectroscopy and capillary zone electrophoresis for the analysis of degradation processes in commercial effervescent tablets containing acetylsalicylic acid and ascorbic acid. J Pharm Biomed Anal. 2017;134:122–9. https://doi.org/10.1016/j.jpba.2016.11.020Neuberger S, Jooß K, Flottmann D, Scriba G, Neusüß C. Raman spectroscopy and capillary zone electrophoresis for the analysis of degradation processes in commercial effervescent tablets containing acetylsalicylic acid and ascorbic acid. J Pharm Biomed Anal. 2017;134:122–9. https://doi.org/10.1016/j.jpba.2016.11.020Shanawany AE, Neugebaur M, El-Sadek M, Rucker G. HPLC method for quantitative determination of ascorbic acid, phenylephrine, paracetamol and caffeine mixture. Indian J Pharm Sci. 1990;52(4):182–5.Shanawany AE, Neugebaur M, El-Sadek M, Rucker G. HPLC method for quantitative determination of ascorbic acid, phenylephrine, paracetamol and caffeine mixture. Indian J Pharm Sci. 1990;52(4):182–5.Goodpaster JV, Keto RO. Identification of ascorbic acid and its degradation products in black powder substitutes. J Forensic Sci. 2004;49(3):523–8.Goodpaster JV, Keto RO. Identification of ascorbic acid and its degradation products in black powder substitutes. J Forensic Sci. 2004;49(3):523–8.Sadamasu Y, Morikawa M, Sakamaki N, Monma K, Kobayashi C. Quantitative analysis of L-ascorbic acid and erythorbic acid in foods by HPLC, and confirmation method by LC-MS/MS. Shokuhin Eiseigaku Zasshi. 2018;59(1):11–7 (In Jap.). https://doi.org/10.3358/shokueishi.59.11Sadamasu Y, Morikawa M, Sakamaki N, Monma K, Kobayashi C. Quantitative analysis of L-ascorbic acid and erythorbic acid in foods by HPLC, and confirmation method by LC-MS/MS. Shokuhin Eiseigaku Zasshi. 2018;59(1):11–7 (In Jap.). https://doi.org/10.3358/shokueishi.59.11Государственная фармакопея Российской Федерации. XII изд. Часть 1. М.: Научный центр экспертизы средств медицинского применения; 2007.The State pharmacopoeia of the Russian Federation. 12th ed. Part 1. Moscow: Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products; 2007 (In Russ.)European Pharmacopoeia online. European Directorate for the Quality of Medicines. Available from: http://online.edqm.euEuropean Pharmacopoeia online. European Directorate for the Quality of Medicines. Available from: http://online.edqm.euUnited States Pharmacopeia. 39th ed. 2016. Available from: http://www.uspnf.com/uspnfUnited States Pharmacopeia. 39th ed. 2016. Available from: http://www.uspnf.com/uspnfПогодина ЛИ. Анализ многокомпонентных лекарственных форм. Минск: Вышэйшая школа; 1985.Pogodina LI. Analysis of multicomponent dosage forms. Minsk: Vysheyshaya shkola; 1985 (In Russ.)Файгль Ф. Капельный анализ органических веществ. М.: Госхимиздат; 1962.Feigl F. Spot tests in organic analysis. Moscow: Goskhimizdat; 1962 (In Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.